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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Adenovirus(AV)
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 保存条件:
负20度
- 规格:
50次
Adenovirus(AV)
产品及特点
1. 即开即用,用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增腺病毒B型,与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次,但只能用于科研。
规格及成分
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | 2×PCR MagicMix | 1 mL(红盖) |
| 试剂二 | 超纯水 | 1 mL(亮黄色) |
| 试剂三 | 腺病毒B型 PCR 引物混合液 | 100 μL(白盖) |
| 试剂四 | 腺病毒B型 PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) |
50 μL(黄盖) |
| 试剂五 | 使用手册 | 1 份 |
自备试剂 样品 DNA。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品,则需要做N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL 腺病毒B型 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性
对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:
| 成份 | N+2 个 样品管 |
PCR 阴性 对照 |
PCR 阳性 对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20μL | 20μL | 20μL |
| 腺病毒B型PCR 引物混合液 | 各2μL | 2μL | 2μL |
| N+2个样品 DNA模板 |
各18μL | -- | -- |
| PCR 阴性对照(水) | -- | 18μL | -- |
| PCR 阳性对照(腺病毒B型PCR阳性对照1000倍稀释液) | -- | -- | 18μL |
- 按下表设置 PCR 反应:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR 反应 (35 个循环) |
95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 7 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。
本试剂盒适用于各种 RNA制品的反转录反应以及随后的PCR扩增。它采用AMV进行反转录反应,能够获得更长的反转录产物。同时,在20ul反转录体系和50ul PCR反应体系中,还可以一次性得到足够量的PCR产物用于后续的克隆实验。本试剂盒中配置的酶均为进口的酶。RT酶采用进口的AMV,所以cDNA更长,基因的信息保留得更完整!反转录过程中特异的RNase抑制剂可有效降低由于外源RNase污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷,可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。
注意:
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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文献和实验)小鼠模型,利用腺病毒相关病毒设计了两套基因传递载体,一种载体携带锌指核酸酶实现基因组剪接,另一种携带正常的F9基因(F9基因突变引发B型血友病)。这样将锌指核酸酶送入到患有乙型血友病的活体实验鼠的肝脏细胞中,利用第一个载体精确地剪除了细胞DNA中基因序列上发生变异的部分,在利用第二个载体将一段正确的基因序列送入细胞中,细胞在修复DNA链条的同时也就补贴好了正确的基因序列。 研究显示转基因实验鼠的血液可在44秒内快速自行凝结,体内相应的凝血物质可恢复到正常量的3-7%,经过八个月的观察,其间
(prohead)、原壳(procapsid)或病毒样颗粒(Virus-like particle, VLP)[1]。噬菌体衣壳装配首先由12个孔道蛋白 gpI聚合成玫瑰形的十二聚体顶角,此顶角为病毒核酸包装和感染细菌过程中核酸出入的通道[2]。在疱疹病毒感染的细胞内有三种衣壳:A型衣壳为一空壳,不含病毒核酸及内部结构;B型衣壳又称中间型衣壳,不含病毒核酸,但在病毒外壳内还有一蛋白 质层;C型颗粒为完整的病毒颗粒。B型衣壳是A、C型的前体,B型衣壳的蛋白 质层为骨架蛋白 ,由VP21、VP22a组成
目前已经开发的或正处于实验阶段的疫苗 (一)病毒类疫苗 1.减毒活疫苗 HIV减毒活疫苗、甲型肝炎疫苗、流感疫苗、牛痘疫苗、脊髓灰质炎疫苗、麻疹疫苗、腺病毒疫苗、黄热病疫苗、风疹疫苗、腮腺炎疫苗、水痘疫苗、轮状病毒疫苗、乙型脑炎疫苗。 2.全病毒灭活疫苗 流感疫苗、狂犬病疫苗、脊髓灰质炎疫苗、甲型肝炎疫苗、流行性出血热疫苗、斑疹伤寒疫苗。亚单位疫苗:乙型肝炎疫苗、流感嗜血杆菌疫苗。
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