- ￥3490
- 康朗生物
- KL-16-24730
- 中国/上海
- 2025年07月11日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Plasmodium malariae
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海康朗生物科技有限公司
- 保存条件：
负20度
- 规格：
50次
Plasmodium malariae
产品及特点
1. 即开即用，用户只需要提供样品 DNA。
2. 用 LAMP 恒温扩增法扩增 ASFV 特异片段，不需要荧光 PCR 等贵重仪器。 同时扩增时间只需要1小时，尤其适合现场或实验条件简陋的单位使用。
3. 检测灵敏性比PCR高10倍以上。
4. 特异性高，由于使用四条针对ASFV保守基因的特异引物，比使用2条引物的PCR专一性更高。
5. 提供无传染性的阳性对照，便于分析实验结果。
6. 每个反应的线性范围：10E2-10E7 拷贝/μL，最低灵敏度：10 拷贝/μL。
7.本试剂盒足够做50次 20μL体系的LAMP扩增。本产品只能用于科研。
规格及成分
| 成份 | 编号 | 十孔盒包装 |
| 2×可视化 UNG-LAMP MagicMix | 试剂一 | 500μL（绿盖） |
| 三日疟原虫LAMP 引物混合液 | 试剂二 | 200μL（白盖） |
| 三日疟原虫LAMP阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL） |
试剂三 | 50μL（黄盖） |
| 使用手册 | 试剂四 | 一份 |
自备试剂：待测样品。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化细菌样品 DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容，包括本公司的一管式病毒DNAout或其升级版柱式病毒DNAout，可去公司的官网搜索。
2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个样品制备，包括一个样品制备阳性对
照（PC）和一个样品制备阴性对照（NC）。样品使用量根据所选择的试剂盒决定。如果样品使用量为XmL，则在XmL水中加10μLMRSA LAMP阳性对照的10000倍稀释液作为样品制备阳性对照，样品制备阴性对照是直接用X mL水作为阴性对照，然后和N个样品一起进行细菌DNA提取操作，得到N+2个DNA样品。
二、LAMP（20μL 体系）
3. 反应设置：如果有N+2个DNA纯化样品，则最好设置N+4个LAMP扩增，增加 LAMP阴性对照和阴性对照各1个。在N+4个PCR管中加入下列成分：
| 成分 | N+2个样品管 | LAMP阴性对照管 | LAMP阳性对照管 |
| 2 ×可视化 UNG-LAMP MagicMix |
各10μL | 10μL | 10μL |
| 三日疟原虫LAMP 引物混合液 |
各 4 μL | 4 μL | 4 μL |
| N+2 个样品 DNA | 各 6 μL | -- | -- |
| LAMP 阴性对照（水） | 6μL | ||
| LAMP 阳性对照（三日疟原虫LAMP阳性对照的 100倍稀释液） | -- | -- | 6μL |
5. 置于 25℃5 分钟（让 UNG 灭活可能的LAMP的污染），然后放 63℃扩增60 分钟。如果是在 PCR 仪中保温，必须加热盖。如果用金属浴保温，没有热盖，必须在孔中加水以填充孔和管子间的空隙，并且在管中加50uL石蜡油，否则保温期间反应体系的水分会蒸发，影响反应效率）。
6. 80℃10 分钟灭活 Bst DNA 聚合酶和 UNG 酶。
7. 将反应管放置在白色背景（如白纸）前观察，观察反应液颜色并用手机照
相留底。
8.实验结果分析。阳性对照将呈现蓝色，无模板的阴性对照将呈现无色或非常浅的蓝色，样品管的颜色如果接近阳性对照则说明有扩增，如果接近阴性对照则说明无扩增。标准的反应结果如下图（9号为阴性，10号为阳性，此处的9号和10号跟下步的电泳照片中的9号和10号是相同的两个样品）：
- 如果需要也可以电泳确认实验结果：取 10μL LAMP 扩增产物直接进行2%琼脂糖凝胶电泳（本产品不需要单独加 loading buffer），最好使用100 bpDNA Marker。如果样品为阳性，将会得到长度为 200bp 的梯形扩增产物。典型的电泳结果见下图（奇数样为阴性结果，偶数样为阳性结果。此处的9号和10号跟上步照片中的9号和10号是相同的两个样品）。
- 注意消除环境污染，LAMP 产物易产生气溶胶，飘在空气中影响下一次实验，建议反应结束后，用紫外灭菌。先加好除阳性对照和样品以外的其它溶液，到另一个房间添加阳性对照及样品，可有效防止引物、MagicMix被污染。
LAMP（Loop-mediated isothermal amplification）是一种新型的滚环扩增技术,在恒温条件下，呈指数级别放大核酸分子，30分钟内将DNA放大109~1010倍。其快速、恒温的独特技术优势，使得LAMP技术成为开发诊断试剂的明星潜力技术。由于在LAMP扩增中用到很高浓度的引物，因此难免保证有少量错配和引物Dimer，这些轻微的污染都会导致LAMP高速的扩增中造成假阳性检测。康朗生物依托独有的显色技术和阴性控制技术建立了全新的LAMP检测平台，包括RNA RT-LAMP Mix、DNA LAMP Mix、DNA Hot LAMP Mix，该系列试剂均可用于黄红变色、橙绿变色和荧光检测。
主要特征
快速检测：可在20~40min内完成检测。
灵敏度高：在优条件下可检测到单拷贝，稳定检测10拷贝。
特异性高：六条特异性引物，保证了产物的特异性和检测的可靠性。
操作简单：恒温检测。
匹配便携式小型设备、可野外操作。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
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文献和实验疟、间日疟和三日疟。后二者又称良性疟。 疟原虫的生活史可分为雌按蚊体内的有性生殖阶段和人体内的无性生殖阶段（见图45-1）。 图45－1 疟原虫生活史和各类抗疟药的作用部位 1．人体内的无性生殖阶段 可分为以下各期： （1）原发性红细胞外期：受感染按蚊叮咬人时，将其唾液中的子孢子输入人体。要30分钟内子孢子即侵入肝细胞中开始其红细胞前期发育和裂体增殖。经过10～14天，生成大量裂殖子。此期不发生症状，为疟疾的潜伏期。对此期有杀灭作用的药物
释放酶活；一类是抗体法修饰的热启动酶，如 Champagne Taq ，预变性 95℃30s 即可释放酶活。使用时注意预变性时间，方能获得满意的扩增效果。 2. 选择 Lamp 扩增长片段 大于 5Kb 的长片段又该如何扩增呢？如果实验对保真度的需求不高，那么就可以使用 LAmp DNA 聚合酶。其保真度是 Taq 酶的 6 倍，可扩增超过 20Kb 的基因组、cDNA 片段，对于低拷贝、低纯度、以及不同 GC 含量的模板都具有很高的成功率。 3. 选择高保真酶快速高效扩增 如果实
病例6：疟原虫感染 寄生于人体的疟原虫有4种，即间日疟原虫（Plasmodium vivax）、恶性疟原虫（Plasmodium falciparum）、三日疟原虫（Plasmodium malariae）和卵形疟原虫（Plasmodium ovale），分别可以引发间日疟、恶性疟、三日疟和卵形疟疾病。在我国主要有间日疟原虫和恶性疟原虫，三日疟原虫少见，卵形疟原虫罕见。疟原虫检查一般是通过薄、厚血涂片染色，直接查找病原体。 1 患者资料
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