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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
88
- 英文名:
Epidemic Encephalitis B
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海沪震实业有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50次
Epidemic Encephalitis B
乙型脑炎(乙脑)病毒(African swine fever, ASF)是由乙型脑炎(乙脑)病毒(African swine fever virus, ASFV)引起猪的一种急性、热性、高度接触传染性疾病,病 死率高达100%,是我国一类动物疫病和世界动物卫生组织规定的必须报告的动物疫病,受到世界各国的高度重视。因此 ASFV 的快速准确鉴定,对该病的预防和检疫有着重要作用,为此本公司开发了ASFV的PCR 检测试剂盒,它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增乙型脑炎(乙脑)病毒,与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次,但只能用于科研。
规格及成分
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | 2×PCR MagicMix | 1 mL(红盖) |
| 试剂二 | 超纯水 | 1 mL(亮黄色) |
| 试剂三 | 乙型脑炎(乙脑)病毒 PCR 引物混合液 | 100 μL(白盖) |
| 试剂四 | 乙型脑炎(乙脑)病毒 PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) |
50 μL(黄盖) |
| 试剂五 | 使用手册 | 1 份 |
自备试剂 样品 DNA。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品,则需要做N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL 乙型脑炎(乙脑)病毒 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性
对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:
| 成份 | N+2 个 样品管 |
PCR 阴性 对照 |
PCR 阳性 对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20μL | 20μL | 20μL |
| 乙型脑炎(乙脑)病毒 PCR 引物混合液 |
各2μL | 2μL | 2μL |
| N+2个样品 DNA模板 |
各18μL | -- | -- |
| PCR 阴性对照(水) | -- | 18μL | -- |
| PCR 阳性对照(乙型脑炎(乙脑)病毒PCR阳性对照1000倍稀释液) | -- | -- | 18μL |
- 按下表设置 PCR 反应:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR 反应 (35 个循环) |
95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 7 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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文献和实验一、危害程度分类 (一)分类等级 流行性乙型脑炎是经蚊虫媒介传播的一种人畜共患性疾病。1935年日本的学者从病死脑炎病人的脑组织中分离到该病毒,国际上,将这种病原体命名为日本脑炎病毒(Jpneseenephitisvirus,JEV),简称“乙脑病毒”。我国称为“流行性乙型脑炎”,简称“乙脑”。根据《中华人民共和国传染病防治法》,流行性乙型脑炎属于乙类传染病。 根据2006年卫生部制定的《人间传染的病原微生物名录》,乙脑病毒属于危害程度第二类的病原微生物。运输包装为A类
流行性乙型脑炎简称乙脑,是由乙脑病毒引起的急性传染病。本病由蚊虫传播,故常在夏秋季流行,以10岁以下儿童多见,乙脑的病变范围较广,脑及脊髓均可累及,临床主要表现有持续高热,头痛、呕吐、意识障碍、抽搐、脑膜刺激和病理反射等。重症患者可留有神经系统的后遗症,如失语、强直性瘫痪、精神失常等,该病重在预防,主要措施有: 一、灭蚊,对预防本病极为重要。 二、房间要有防蚊设施,防止蚊虫叮咬。 三、对10岁以下儿童及时接种乙脑灭活
欧洲 英国 北美洲 北美洲 第一节 流行性乙型脑炎病毒 本病毒首先(1953年)在日本从患者脑组织中分离获得,因此称日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus ,JEV),所致疾病在日本称日本乙型脑炎(JBE)。1950年以来,我国对该病进行了大量病原学和流行病学研究,为了与甲型脑炎相区别,定名为流行性乙型脑炎,简称乙脑,是我国夏秋季流行的主要传染病之一,除新疆、西藏、青海外,全国各地均有病例发生,年发病人数2.5万,病死率10
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