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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
88
- 英文名:
Eperythrozoon suis
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海沪震实业有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50次
Eperythrozoon suis
猪附红细胞体(猪嗜血支原体)(African swine fever, ASF)是由猪附红细胞体(猪嗜血支原体)(African swine fever virus, ASFV)引起猪的一种急性、热性、高度接触传染性疾病,病 死率高达100%,是我国一类动物疫病和世界动物卫生组织规定的必须报告的动物疫病,受到世界各国的高度重视。因此 ASFV 的快速准确鉴定,对该病的预防和检疫有着重要作用,为此本公司开发了ASFV的PCR 检测试剂盒,它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增猪附红细胞体(猪嗜血支原体),与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次,但只能用于科研。
规格及成分
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | 2×PCR MagicMix | 1 mL(红盖) |
| 试剂二 | 超纯水 | 1 mL(亮黄色) |
| 试剂三 | 猪附红细胞体(猪嗜血支原体) PCR 引物混合液 | 100 μL(白盖) |
| 试剂四 | 猪附红细胞体(猪嗜血支原体) PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) |
50 μL(黄盖) |
| 试剂五 | 使用手册 | 1 份 |
自备试剂 样品 DNA。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品,则需要做N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL 猪附红细胞体(猪嗜血支原体) PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性
对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:
| 成份 | N+2 个 样品管 |
PCR 阴性 对照 |
PCR 阳性 对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20μL | 20μL | 20μL |
| 猪附红细胞体(猪嗜血支原体) PCR 引物混合液 |
各2μL | 2μL | 2μL |
| N+2个样品 DNA模板 |
各18μL | -- | -- |
| PCR 阴性对照(水) | -- | 18μL | -- |
| PCR 阳性对照(猪附红细胞体(猪嗜血支原体)PCR阳性对照1000倍稀释液) | -- | -- | 18μL |
- 按下表设置 PCR 反应:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR 反应 (35 个循环) |
95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 7 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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文献和实验猪附红细胞体病 是猪附红细胞体,属立克次体目,寄生于细胞内,也可游离于血浆中。不同品种和年龄的猪均易感,仔猪的发病率和病死率较高。本病多发生在夏季,传播与吸血昆虫有关,特别是猪虱。另外,注射针头、手术器械、交配等也可传播。应激因素如饲管不良,气候恶劣或其它疾病,可使隐性感染猪发病。 临床特点 :主要呈现出急性黄疸性贫血和发热。母猪生产性能下降,仔猪体质变差,贫血,肠道及呼吸道感染增加。育肥猪病初精神萎顿,体温升高到39 .5℃-42
一下? 4.在附红细胞体的电镜观察和体外培养的研究上,国外仍没有较成功的体外培养,为什么国内很多论文都说自己培养出了附红细胞体。抽提过DNA,鉴定过16SrRNA基因序列吗? 5.附红细胞体还有很多病原学的基础研究还没明白,致病基理也不是很清楚,是否能体外培养也是问题,有很多论文就说附红细胞体的抗原己经纯化出来了,做出了疫苗? 最后,我觉得很多论文误导了大家。我希望大家看一下花象柏老先生的论文《广泛报道的所谓“猪附红细胞体病”存在误导问题》,写得真好。
副猪嗜血杆菌(HPs) 酶联免疫 分析( ELISA ) 试剂 盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中 副猪嗜血杆菌(HPs)的 含量。 实验原理 : 本试剂盒应用 双抗体 夹心法测定 标本 中 副猪嗜血杆菌(HPs ) 水平。用纯化的 副猪嗜血杆菌(HPs )抗体 包被微孔板,制成固相 抗 体,往包被 单抗 的微孔中依次加入 副猪嗜血杆菌(HPs ) ,再与HRP 标记的副猪嗜血
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