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- 2025年11月04日
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文献和实验加入100ml 不含钙和镁的PBS洗下沉淀。9. 将SW28超速离心管插入到50ml锥底离心管中，盖上盖子。10. 在4℃溶解2小时，每隔20分钟轻轻震荡。11. 4℃，500g离心1分钟，使溶液集中于管底。12. 用200μl 移液器轻柔吹打使沉淀重悬。避免产生泡沫。将所有管中的液体集中到一个SW28离心管中。13. 集中后的病毒悬液分装成50μl 每份，保存在成品管中。用碎干冰速冻后储存在-80 ℃。方法二：依科赛慢病毒浓缩液1. 收集上清液，3000×g离心15分钟清除细胞和细胞
越低，重复性越差，应减少样品的稀释倍数。 Q9．变性温度是否合适 大部分的双链DNA在95°C就开始解链了，在有些情况下在90至94°C都不能很好地变性DNA。由于部分变性，参加反应的探针和引物相应的减少了，因此反应效率会下降。 Q10．变性时间是否合适 15到20秒对于变性扩增子是足够了，然而，长一点的产物，可能会需要30秒，60秒的变性时间通常是不需要的。 Q11．退火温度和时间是否合适 检查引物和探针的Tm值
液中，必须使用前先行配制完成。14 DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？ 冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO (如Sigma D2650)，其本身即为无菌状况，第一次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于4 C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜。15 冷冻保存细胞之方法？ 冷冻保存方法一：冷冻管置于4 C 30~60分钟 → (-20 C 30
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