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- 2025年12月02日
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文献和实验Natural History Museum Protocol for EST sequencing from lamb
- (if the agarose gel in step 4 only shows a weak band, use less than 50µl of water to elute). Direct Purification Buffer: 50mM KCl (=0.37g/100ml) 10mM Tris-HCL (pH 8.8 at 25℃) (=0.12g/100ml) 1.5mM MgCl2 (=0.03g/100ml) 0.1% Triton X-100 (=100µl/100ml
Natural History Museum Protocol for EST sequencing from lambda zap phage plaques
(see below) 2µl of phage suspension from step (2) 27µl of water overlay with mineral oil and cycle through 25 cycles of: 94oC (1 minute) 58oC (1 minute) 72oC (1.5 minutes) x10 PCR buffer: 670mM
. After electrophoresis, remove the buffer wells, the tape, and pry the gel plates apart. The gel should adhere to back plate. Blot the gel to a 40 cm X 20 cm sheet of 3MM Whatman paper, cover with plastic wrap, and dry on a Hoefer gel dryer for 25 minutes at 80℃ 11
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