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文献和实验时间:少于5分钟 20、功率:最高70瓦特,100~240 VAC,50/60赫兹 21、运行环境:15~30 ℃; 22、尺寸:11寸高x14.3寸宽x16.5寸深(27.9x36.3x41.9厘米) 23、重量:30磅 24、流动室容量:1升鞘液、1升废液、250毫升清洁剂、250毫升消毒液 25、信号处理:24位A/D转换 26、电脑:17寸平面显示器,2GB内存 27、电脑界面:USB 2.0
设置:在25ul 反应体系中,含1 倍的扩增缓冲液,3.0mMMgCl 2 ,0.2mM dNTPs,0.2um 随机引物,1.5uTaqDNA 聚合酶,20ng 模板DNA。 PCR 参数设置:94℃预变性5min,94℃变性5s,36℃退火30s,72℃延伸50s,共37 循环,于 72℃下延伸 5min,置于 4℃保存。反应在 PE2400 型 DNA 扩增仪上进行,取 12ul扩增产物在1.4%琼脂糖凝胶上电泳和EB(0.5ug/ml)染色后置于紫外透射检测
PCR引物设计和优化(PCR PRIMER DESIGN AND REACTION OPTIMISATION)
from 40 - 45 cycles to amplify 50 target molecules, and 25 - 30 to amplify 3x105 molecules to the same concentration. This non-proportionality is due to a so-called plateau effect, which is the attenuation in the exponential rate of product accumulation
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