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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
TMB Single-Component Substrate solution
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海泽叶生物科技有限公司
- 保存条件:
Store at 2-8℃ for one year
- 规格:
盒
| 20ml | 220.00元 |
| 50ml | 360.00元 |
| 100ml | 680.00元 |
| 英文名称 | TMB Single-Component Substrate solution |
| 中文名称 | 单组分超灵敏TMB显色液 |
| 别 名 | TMB Solution; Soluble TMB Substrate Solution; TMB kit; TMB One Solution (HRP-based ELISA); |
| 保存条件 | Store at 2-8℃ for one year. |
| 产品介绍 | 简介 目前酶免疫分析(EIA)技术,已被广泛应用于抗原,半抗原或抗体的定量或定性检测分析。辣根过氧化物酶(HRP)及其偶联物是酶联免疫分析技术中常用的一种酶,3,3’5,5’-四甲二盐酸(3,3´,5,5´tetramethylbenzidine,TMB)为过氧化物酶底物,常用作ELISA等免疫检测的显色剂。TMB被过氧化氢氧化时(由HRP催化)可形成蓝色产物,主要吸收峰在370nm和652nm。加入硫酸等酸性终止液后,变成黄色,最大吸收峰为450nm。TMB灵敏度很高,达到相同的检测灵敏度需要的量比ABTS少,但这也可能产生较高的背景,所以要求使用较少的蛋白或较低的抗体浓度。 单组分超灵敏TMB显色液无需混合,方便快捷,减少误差,灵敏度高。 试剂盒内容: TMB显色液A 50ml 100ml TMB终止液B 50ml 100ml 说明书 一份 保存方法: 2-8 ºC避光保存,一年有效。 显色步骤 1、加液:待样品孔中加完HRP结合物并孵育一定时间后,用适当洗涤液洗板3-5次,每孔加底物显色液A 100ul,根据个人实验需要,在室温(15-25℃)或37℃下避光温育10-30分钟或更长时间,直至显色至预期深浅。 2、终止:每孔加入100ul终止液B终止反应,孔中反应液由蓝色变为黄色。 3、终止反应后15分钟内在450nm处测定各孔溶液的吸光值。 4、对照:空白对照不加HRP标记的抗体/抗原和阴性对照结果应无色。阳性对照及加HRP标记的抗体/抗原产生深蓝色产物。 5、注意:如果出现高的反应背景或沉淀,表明TMB底物反应过于强烈。为了避免产生沉淀,可在终止后马上读数;或者进一步稀释一抗和/或HRP结合物。 安全性: 1、实验用品应该专一,避免交叉污染。 2、TMB对人体有刺激性,请注意适当防护。 3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
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文献和实验【公告】丁香通试用中心:10月免费试用装精选(10月18日有更新)
200ul低吸附盒装吸头 进口TS3000转染试剂 纳米微粒 非脂质体 其他推荐: 单组分TMB显色液 Peroxidase Conjugated Goat Anti-Rabbit IgG (Min Hu, Ms) 二抗 96通道个人型半自动移液系统 小动物气体麻醉机,大小鼠气体吸入式麻醉机 四通道实时荧光定量PCR检测系统 Tanon-5200化学发光成像系统(包邮) 优质微晶纤维素MCC(进口) 罗恩1-10ml电动移液器 EpiScript逆转录酶 western
30s 20m30s 从以上图片可以看出,SuperSignal West Pico比ELC prime灵敏度约低25倍。 2. 两张膜上上样量有无区别? 从图上可以看出,加入TMB显色底物后,两膜第三点均能显色,而第四点均不显色。说明上样无明显区别。 结论:SuperSignal West Pico灵敏度较低,与TMB显色相近。(sigma的TMB显色液标称灵敏度0.125ng) 跟他们公司的技术沟通了下,结果回复:感谢您致电Thermo Fisher
ELISA实验因灵敏度高,特异性强在生物科研上得到了广泛的认可,但对初学者而言,如不注意实验操作过程中的各个环节,可能会对最终的实验结果产生比较大的影响,比如实验出现白板,显色弱灵敏度低,花板无梯度背景高等现象。下面对以上实验现象进行一一解析。1.白板现象在完成所有实验步骤进行底物TMB溶液显色后,酶标板中所有孔的颜色均为无色,即无信号呈现。出现该现象的可能原因:试剂已过保质期,不同批次稀释液交叉使用。错加漏加检测A,检测B或者底物溶液TMB。洗板或者加样过程中,酶标记物被污染失活,稀释液中
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