- ￥70 - 100
- 泽叶生物
- ZY-960001
- 中国
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Western Blocking Buffer
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海泽叶生物科技有限公司
- 保存条件：
Store at 2-8℃ for one month
- 规格：
盒
| 60ml | 70.00元 |
| 100ml | 100.00元 |
| 英文名称 | Western Blocking Buffer |
| 中文名称 | WB封闭液（脱脂奶粉） |
| 别 名 | SMP，skimmed milk powder; non-fat milk powder; Blocking Buffer; |
| 保存条件 | Store at 2-8℃ for one month. |
| 产品介绍 | 简介 WB封闭液(Western Blocking Buffer)可用于WB时转移了蛋白样品的NC膜或PVDF膜非特异性结合位点的封闭。封闭后，可以减少后续的一抗或二抗与膜的非特异性结合，降低背景着色，增强信噪比。 本产品组分为0.01M TBS（pH7.4），含5%脱脂奶粉。 使用说明： 完成转膜后，用WB洗涤液洗涤蛋白膜1-2分钟。加入WB封闭液，封闭60分钟，然后进行一抗孵育等后续操作。 注意事项： 1．本产品属蛋白制剂，室温放置过久易导致蛋白的降解和活性丧失。 2．反复冻融亦会导致蛋白活性的丧失。 3．本产品含防腐剂，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 4．通常在室温封闭60分钟即可。如果对于一些抗体，背景非常高，可以在4℃封闭过夜。 |
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文献和实验封闭，就会背景脏得不得了。还有一点就是脱脂奶粉的 IgG 能和抗山羊的二抗有交叉反应……所以……第二种封闭液就是 BSA，这个相对来说贵一些，一般会用于一些磷酸化的 WB 里。但是，有些 BSA 偶联的多肽要做 WB 的话，就绝对不能用 BSA 作为封闭液。第三种封闭液估计你们不会特别常用，其实就是吉利丁，做过布丁或者慕斯蛋糕的同学可能知道这是啥。其实就是 Fish Gelatin，鱼明胶，但是这种封闭液成分价钱很傲娇，所以平时没什么人会使用这个。还有一种比较常用的封闭液，就是 0.25 - 2%
① 膜封闭时间不够，室温下通常摇床孵育膜 1h，出现这种情况可以更换合适的封闭液或者适当延长封闭的时间； ② 抗原抗体免疫过程中一抗稀释度太高，可以多设置几组一抗浓度，摸索最适宜的抗体稀释度； ③ 在整个实验过程中膜发生干燥或手套反复接触过也会发生背景值高的情况，因此实验过程中要注意保持膜的湿润，使用镊子夹取膜。 3、WB 结果中有杂带干扰 ① 抗体纯度不高会产生非特异性条带影响结果，高纯度抗体条带特异性更好，建议更换抗体； ② 一抗浓度过高，降低一抗稀释比，目的条带和杂带可能会减弱
。下面是来自使用者的反馈数据： 1、蛋白含量低，得到的WB信号弱--SignalBoostTM可以增强信号，检测到低丰度蛋白： 样品：K562细胞全细胞裂解液。 （Lane 1: 25μg总蛋白；Lane 2: 5μg总蛋白；Lane 3: 2.5μg总蛋白） 一抗：anti-PKC（Ab－2）小鼠单抗（MC5）（货号OP74），分别用5%脱脂奶粉PBST溶液（图A）和SignalBoost Solution 1（图B）按照1：1000比例稀释。 二抗：Rabbit anti
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