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一个月
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现货
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上海泽叶生物科技有限公司
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盒
中文名:8×10暗盒
英文名:8×10暗盒
CAS:N/A
级别:N/A
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分子式:N/A
纯度:N/A
储存条件:RT
| 产品编号 | 规格 | 目录价(¥) | 优惠价(¥) | 数量 | 操作 |
|---|---|---|---|---|---|
| ZY-810 | 盒 | 180 | 180 |
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文献和实验加入:Labeling 5× buffer 10 μl(含有随机引物)dNTPmix 2 μl(含 dCTP、dGTP、dTTP 各 0.5 mM)BSA(小牛血清白蛋白)2 μl[ a -32 P]dATP 3μlKlenow 酶 5 U3. 将变性模板 DNA 加入到上管中,加 ddH2O 至 50 μl,混匀。室温或 37 ℃ 1 hr。4. 加 50 μl 终止缓冲液终止反应。标记后的探针可以直接使用或过柱纯化后使用。由于 a -32 P 的半衰期只有 14 天,所以标记好的探针应尽快使用。探针的比活性最好
荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)
oC培养箱中烤片2~3h。(经Giemsa染色的标本需预先在固定液中退色后再烤片)。 ②取出玻片标本,将其浸在70~75oC的体积分数70%甲酰胺/2×SSC的变性液中变性2~3min。 ③立即按顺序将标本经体积分数70%、体积分数90%和体积分数100%冰乙醇系列脱水,每次5min,然后空气干燥。3)杂交 将已变性或预退火的DNA探针10μL 滴于已变性并脱水的玻片标本上,盖上18×18盖玻片,用Parafilm封片,置于潮湿暗盒中37oC杂交过夜(约15~17h)。由于杂交液较少,而且杂交
细胞在经过处理,抹以粘附剂的载片上,在43℃烤箱过夜。 (3)在PBS(0.1mol/l Ph7.2)中浸5~10min。 (4)浸于0.1mol/L甘氨酸—PBs 液内5min。 (5)为增强组织通透性,将载片置于0.3%Triton X-100(在PBS内)10~15min。 (6)PBS洗3×5min。 (7)在蛋白激酶K(1μg/ml)溶于Tris –HCl (0.1mol/L, pH
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