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文献和实验一般保存于－20℃，一般解冻是放在4℃冰箱解冻，耗时长，而且必须解决完全之后，才能进行完全培养基的配制。所以要提前几个小时就将血清从－20℃转入4℃，以期完全解冻。当然如果这一次就需要用完的话（是指用这些血清配制的培养液都用完），也可以放到37℃解冻。第四，最重要的是保证过程中无菌。液体必须要分装。无论过程中用到的培养液、胰酶、血清、PBS、生理盐水、抗生素尽量分装。分装是为了防止污染。如果操作有误，仅能威胁到其中一支，而非整个。培养液、血清、PBS、生理盐水分装为20mL、50mL或100mL
擦洗－紫外灯照。预防霉菌污染，可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制霉菌素或放线菌素D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或放线菌素D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞。，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作3、支原体：黑色的，好象多为多形，培养液一般培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后，细胞
，以确保胶条插入位置准确。合拢灌胶模具后并直立放置，双手均匀用力向下扣住翼型扳手以关闭灌胶模具。若位置正确，校准卡应该可以正常上下抽拉活动而不被夹在胶条与玻璃板之间。（图3- 5） •用5 ml分离胶溶液（图 6）制备浓度为12％的SDS-PAGE凝胶，然后用移液管将1 ml乙醇滴入装好的灌胶模具中。等候60分钟使凝胶聚合。当把溶液倒入玻璃板夹层之间时，将移液管嘴直接置于玻璃板之间，缓慢地滴出液体，尽量避免形成气泡。凝胶完成聚合后，移除乙醇，将制备好的浓缩胶溶液倒入到分离胶上。轻轻将0.75 mm
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