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- 英文名:
Alkali pyrolysis solution I
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一年
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上海泽叶生物科技有限公司
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瓶
中文名:碱裂解溶液I(质粒制备)
英文名:Alkali pyrolysis solution I
CAS:N/A
级别:N/A
分子量:N/A
分子式:N/A
纯度:N/A
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| 产品编号 | 规格 | 目录价(¥) | 优惠价(¥) | 数量 | 操作 |
|---|---|---|---|---|---|
| ZY2078-100ml | 100ml | 160 | 160 |
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文献和实验【讨论】碱裂解法大规模质粒提取,自己配的溶液提出2000ug/ml的质粒啊
wubin6638 我自己配的溶液 按的是这样的步骤 1.收集400ml菌液的沉淀于50ml离心管中,加入7ml冰预冷的STE,震荡至彻底悬浮。(此时,共收集了4管细菌沉淀) 2. 2管合为1管,然后,4000-5000g,4℃离心15min,弃上清,倒置,使液体流净。 3.将收集的菌体用8ml溶液I悬浮,混匀。 4.加入16ml新鲜配制的溶液II,盖紧离心管盖,温和上下颠倒混匀5-7次,室温放置(最好冰上放置)5min
1. 质粒制备的基本原理是什么? 答:做过分子生物学实验的,大多数做抽提过质粒,但不是所有人都知道质粒制备的基本原理。所以有必要做一个说明,能帮助您了解和解决实验过程中遇到的一些问题。制备质粒最常用的方式是碱裂解法。质粒被转化到细菌中,单菌落接种到含有特定抗生素的培养基中,一般培养到细菌生长的平台期离心收集细胞;细菌用悬浮液(Solution I, 内含RNase A)悬浮细胞,用SDS-NaOH (Solution II)裂解。SDS是很强的去污剂,抽提出细胞膜蛋白质和磷脂,释放出细胞内物质
质粒是真核细胞细胞核外或原核生物拟核外能够进行自主复制的遗传单位,是细胞内的一种环状的小分子DNA,作为一个具有自身复制起点的复制单位独立于细胞的主染色体之外。质粒是分子生物学实验中不可缺少的工具载体。高质量的质粒提取是下游试验顺利进行的可靠保证。 质粒制备的方法主要包括以下三个步骤: 细菌的培养及扩增; 细菌的收获和裂解:一般常用碱裂解法。 质粒提取纯化。 做过分子生物学实验的,大多数做抽提过质粒,但不是所有人都知道质粒制备的基本原理。所以我们先介绍一下质粒制备的原理。制备质粒最常
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