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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃&-80℃
- 保质期:
3个月~12个月
- 英文名:
pEnCMV-BRD2-p-3×FLAG
- 库存:
大量
- 供应商:
上海禾午生物科技有限公司
- 规格:
2ug冻干粉&300ul甘油菌
| 别名 | NM_001123085.1;RING3 |
| 启动子 | CMV |
| 复制子 | pUC |
| 原核抗性 | Amp |
| 筛选标记 | G418 |
| 克隆菌株 | DH5a |
| 培养条件 | 37度 |
| 备注 | 2409bp |
| 质粒宿主 | 哺乳细胞 |
| 质粒用途 | 蛋白表达 |
| 片段类型 | ORF |
| 片段物种 | 猪 |
| 原核抗性 | Amp |
| 真核抗性 | G418 |
| pLVX-ITGA1-mCherry(1同义突变)质粒 |
| pECMV-GPBAR1-3×FLAG质粒 |
| pAAV-EF1a-AGER-DIO-mCherry质粒 |
| pEnCMV-EGFR-19-DEL T790M-3×FLAG质粒 |
| pECMV-Slc12a3(mouse)-6×His-FLAG质粒 |
| pEnCMV-EGFR-19-DEL-3×FLAG质粒 |
| pEnCMV-EGFR L858R-3×FLAG(2同义突变)质粒 |
| pEnCMV-EGFR L858R+T790M-3×FLAG(2同义突变)质粒 |
| pCDH-ECMV-Ptx3(mouse)-3×FLAG-EF1α-ZsGreen1-T2A-Puro质粒 |
| pECMV-3×FLAG-Adh5-r质粒 |
| pCDNA3.1-PRDX6-6×His质粒 |
| pCDNA3.0-HA-p53-R248Q质粒 |
| pEnCMV-NUDC-3×FLAG质粒 |
| pEGFP-Gsdmd(1-976)(mouse)质粒 |
| pECMV-Fos-m-FLAG质粒 |
| pOTB7-ARHGDIB(1同义突变)质粒 |
| pCR4-TOPO-PRPSAP2质粒 |
质粒相关图谱、序列及其他内容可查询公司官司网 收到质粒干粉后请先短暂离心,再加入20ul ddH2O 溶解质粒,然后转化进相应的感受态中,再挑取单菌落提取质粒(提供图谱 序列 测序报告 售后)暂时不使用可先放置于-20℃保存,TE缓冲液中-80℃的DNA更佳
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文献和实验会怎样"用 CRISPRa。 --- 一、机制差异决定了两者能回答的问题不同 过表达质粒(cDNA / ORF) 外源启动子(CMV、EF1α 等)驱动,表达量与内源调控完全脱钩; 通常只包含单一 CDS,不含内含子和 UTR; 表达量可达到内源的几十到几百倍; 可携带标签(FLAG、HA、GFP)方便检测。 CRISPRa(dCas9-VP64 / VPR / SAM / SunTag) 失活 Cas9(dCas9)融合转录激活域,被 gRNA 引导至靶基因启动子区; 激活的是内源位点,转录本包含完整的内含
克隆 or 单克隆) --- 一、第一步:载体设计 载体元件由实验目的决定,逐项确认: 元件 选择要点 启动子 普遍高表达选 CMV、EF1α 等;需要模拟内源水平或避免沉默可考虑其他启动子 目的基因 CDS 序列;是否需要做 WB 决定是否加 Flag/HA 等融合标签 荧光标签 是否需要观察感染效率或做活细胞示踪(GFP/mCherry 等) 抗性基因 常用 puromycin(Puro),也可选新霉素(Neomycin)、杀稻瘟菌素(Blasticidin) 其他元件
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