- ￥200
- 信裕生物
- XYL6500
- 中国
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
PBS-triton solution
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海信裕生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
500ml
中文名:细胞透膜液/PBS-triton
英文名:PBS-triton solution
CAS:N/A
级别:N/A
分子量:N/A
分子式:N/A
纯度:N/A
储存条件:2-8℃
产品简介产品说明：
免疫染色强力通透液可以用于免疫染色等多种原位检测时细胞样品、冰冻或石蜡切片的通透处理，有助于暴露抗原、核酸等作用靶点，使抗体、探针或标记物等更容易进入细胞内，从而确保并增强染色等的检测效果。本产品为即用型工作液，可以直接使用，无需稀释。
本产品通透能力强，推荐用于各种常规的免疫荧光、免疫组化、免疫细胞化学、流式检测等实验中细胞的通透，对于需要检测细胞膜蛋白的情况推荐使用Saponin 通透液。
Triton X-100是常用的通透试剂，可以通透细胞膜和核膜，作用的原理也是非特异性地溶解细胞膜，因此其缺点是不利于膜蛋白的检测，，相当一部分膜蛋白会被交联固定，从而不会被Triton X-100溶解， 因此后续仍然能检测到。Saponin可以特异性地溶解细胞膜中的胆固醇，从而实现在细胞膜上选择性地打孔，其优点是适合于细胞膜蛋白的检测，特别适合通过流式细胞仪检测细胞膜上的标志性蛋白，缺点是对于一些胆固醇含量低的细胞通透效果差，通透效果弱于Triton X-100和有机溶剂，并且不能通透胆固醇含量很低的核膜和线粒体膜。对于凝集素(lectin)的检测， 含Triton X-100等非特异性去垢剂的通透液的效果显著优于主要含Saponin的通透液。
本免疫染色强力通透液中含有Triton X-100等去垢剂，配制在PBS中。
使用说明：
1. 对于切片，在固定、洗涤结束后，每样滴50-100μL免疫染色强力通透液，也可以在染色缸中完全浸没进行通透。
对于细胞样品，在固定、洗涤结束后，按照六孔板每孔加入1mL免疫染色强力通透液，其它多孔板参考该比例加入。
对于其它样品，加入免疫染色强力通透液的量以充分盖住样品为准。
2. 通常在免疫染色强力通透液中室温孵育5-10分钟，即可完成通透。对于较难通透的样品或者要求通透特别充分的情况，可以在免疫染色强力通透液中室温孵育10-30分钟。
注意：
通透步骤只在检测细胞内抗原表位的时候才需要，因为抗体需要进入细胞内部去检测蛋白。但是，如果待检测的是跨膜蛋白，且其抗原表位处于胞质内区域，则同样需要对细胞进行通透。相反，如果所检测的抗原表位位于膜蛋白的胞外段，则不需要进行通透。，因此用作为固定剂时是不需要通透的。甲醇同样具有通透作用，但有些场合并不适合用甲醇，因为一些表位对甲醇非常敏感。
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文献和实验固定和透化 在培养板中将已爬好细胞的盖玻片用 1 × PBS 浸洗 3 次，每次 3 min。 用 4% 的多聚甲醛固定爬片 15 min，1 × PBS 浸洗玻片 3次，每次 3 min。 0.5%Triton X-100(1× PBS 配制 )室温通透细胞 15 min（细胞膜上表达的抗原省略此步骤）, 1 × PBS 浸洗玻片 3 次，每次 3 min。 封闭 吸水纸吸干 1 ×PBS，在玻片上滴加 5% 的正常血清（与二抗种属来源一致或相似），室温封闭 1 h
1、在什么情况下使用TritonX-100？（1）Triton X-100化学名称为聚乙二醇辛基苯基醚，是一种去污剂。在免疫组织化学(>10um厚切片) 和免疫细胞化学中一般用Triton X-100 作为细胞通透剂，在膜上打孔。（2）其作用原理：Triton X-100 可以溶解细胞膜、细胞核膜、细胞器膜上的脂质而使抗体及大分子结构的物质进入胞浆和胞核内，故在细胞免疫组化时尤为推荐使用，这样抗体就能顺利进入胞内与相应抗原结合。（3)Triton X-100既是一种表面活性剂，也有抗
液，用 PBS 清洗细胞 3 次 使用 4% 多聚甲醛在室温下固定 15 min 后观察细胞形态 弃去 4% 多聚甲醛，用 PBS 清洗细胞 3 次，每次 5 min （不透化）加入 1% Triton X-100 透化 5 min 后用 PBS 清洗细胞 3 次 配制所需染色工作液体积 加入 300μL 色工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞 37℃ 避光孵育细胞 30 min。 吸除染色工作液，再用 PBS 洗涤 3 次，每次 5 min 取出细胞爬片，用含 DAPI 封片剂进行封片 激光
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