- ￥200
- 泽叶生物
- ZY7650-50ml
- 中国
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
AO-EB Stain Kit
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海泽叶生物科技有限公司
- 保存条件：
RT
- 规格：
50ml
中文名:吖啶橙(AO)- EB双染色试剂盒（2组份）
英文名:AO-EB Stain Kit
CAS:N/A
级别:N/A
分子量:N/A
分子式:N/A
纯度:N/A
储存条件:RT
产品简介
产品简介：
吖啶橙能透过胞膜完整的细胞，嵌入细胞核DNA，与双链DNA结合后发出绿色荧光，溴化乙锭(EB)仅能透过胞膜受损的细胞，嵌入核DNA，发橘红色荧光。凋亡的细胞呈现为染色增强，荧光更为明亮，均匀一致的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅不一的结构样特征。二者很容易判别。在荧光显微镜下观察，可见四种细胞形态：活细胞(VN)，核染色质着绿色并呈正常结构；早期凋亡细胞(VA)，核染色质着绿色呈固缩状或圆珠状；晚期凋亡细胞(NVA)，核染色质为橘红色并呈固缩状或圆珠状；非凋亡的死亡细胞(NVN)，核染色质着橘红色并呈正常结构。本产品AO、EB溶液浓度分别为100ug/ml，所含稳定剂不影响实验效果。
使用方法:
1、使用前先根据用量，将AO溶液和EB溶液按1:1混合成工作液，现用现配。
2、对于贴壁细胞或爬片，去掉培养基，用PBS洗两遍去除残余培养基和未贴壁细胞，加入新的PBS；如果需要观察全部细胞特性，保留未贴壁细胞，可以直接在培养基中加入工作液。按照100uL培养基或PBS中加入4uL工作液即可。室温放置2-5min后于荧光显微镜下观察。
3、对于悬浮细胞，可直接加入工作液或离心收集细胞后在PBS中加入工作液。按照每100uL培养基或PBS中加入4uL工作液即可。室温放置2-5min后于荧光显微镜下观察。
注意事项：
1、含酚红培养基对观察有轻微影响。建议使用无酚红培养基。
2、染色液工作浓度和染色时间可根据具体实验情况适当调整，以期达到最佳效果。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
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文献和实验通用，尤其是在进行动态检查时。医琳师妹：我将我所作的方法与大家共享：吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色测定PC12细胞凋亡（acridine orange/ethidium bromide, AO/EB）：（1）细胞爬片：在6孔培养板中预先置入玻璃盖玻片，接种细胞悬液，干预后，予95%乙醇固定15分钟，微干，然后准备荧光染色。将100mg/L溶于PBS的吖啶橙和100mg/L溶于PBS的溴化乙锭各5μl（临用前混合加入，加样量宜小，有时各2μl-5μl足够，量太大容易形成细胞凋亡的假阳性），在照相前混匀
染料同时染色细胞，为鉴别凋亡细胞和坏死细胞提供较好的方法。 染料： 吖啶橙(AO)膜通透性较高的染料 溴化乙啶(EB） 正常细胞： AO－ 绿色荧光强， EB－ 染色红色荧光较弱； 凋亡细胞： AO－ 绿色荧光强度弱减， EB－ 染色红色荧光加强； 坏死细胞： AO－ 绿色荧光强度弱或消失， EB－ 染色红色荧光强 （EB可诱导AO的淬灭）。
基本原理： 吖啶橙（acridine orange，AO）是一种常用荧光染料，吖啶橙与原代细胞内的DNA、RNA都有亲和力，但有一定的特异性，即结合后发不同颜色的荧光，DNA呈亮绿色，而RNA呈橘红色至火红色。此法简便快捷，既可染活原代细胞又可染固定原代细胞。用于直接染色观察活原代细胞或固定染色观察原代细胞均可。吖啶橙对活原代细胞毒性小，配成1×10-4 —2×10-4 可用于直接染色活原代细胞和进行荧光显微镜观察，但不持久，用固定染色观察法效果更好。 材料： 1. 盖片单层
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