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- 库存:
大量
- 英文名:
10×Giemsa Staining Solution
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海泽叶生物科技有限公司
- 保存条件:
RT
- 规格:
100ml/500ml
中文名:10×姬姆萨溶液
英文名:10×Giemsa Staining Solution
CAS:NA
级别:N/A
分子量:N/A
分子式:N/A
纯度:N/A
储存条件:RT产品简介
姬姆萨色素(又称吉姆萨色素)是由天青Ⅱ与伊红混合而成,Giemsa 染色原理和结果与瑞氏色素染色基本相同,姬姆萨染色液对胞浆着色力较强,能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒,着色清晰,但是对胞核着色偏深,核结构显色不佳,故姬姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。
本公司 10×姬姆萨溶液以优质的姬姆萨色素、甲醇为主要原料,含特有衬染剂,经研磨配制而成,能呈现出清晰的细胞染色效果,常用于组织切片、血液和细胞涂片、细菌、染色体显带、原生动物寄生虫等染色。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,呈粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,呈紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,呈淡紫色,称为中性物质。
一、一步法涂片染色
1、Giemsa 工作液的配制:
Giemsa Stain(10×)、磷酸盐缓冲液(10×)、蒸馏水,按 1:1:8 混合,充分混匀,即为 Giemsa 工作液。
注:Giemsa 工作液不易保存,现配现用。
2、常规方法制备血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定 1-3min。
3、将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,滴加 Giemsa 工作液覆盖涂片,室温下染色 15-30min。
4、用自来水或蒸馏水从玻片一端缓慢冲洗。
5、干燥、镜检
染色结果:

二、 两步法涂片染色
1、Giemsa 工作液的配制:
Giemsa Stain(10×)、蒸馏水按 1:4 中充分混匀,即为 Giemsa 工作液。注:Giemsa 工作液不易保存,
现配现用。
2、磷酸盐工作液的配制:
磷酸盐缓冲液(10×)、蒸馏水按 1:4 充分混匀,即为磷酸盐工作液。
3、常规方法制备血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定 1~3min。
4、将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,滴加 Giemsa 工作液覆盖涂片,室温下染色 10-15min。
5、加入等量磷酸盐工作液,轻轻晃动载玻片,室温静置 5-10min。
6、用自来水或蒸馏水从玻片一端缓慢冲洗。
7、干燥、镜检。
染色结果:

三、组织切片染色
1、Giemsa 工作液的配制:
Giemsa Stain(10×)、磷酸盐缓冲液(10×)、蒸馏水,按 1:1:8 混合,充分混匀,即为 Giemsa 工作液。
注:Giemsa 工作液不易保存,现配现用。
2、新鲜组织立即置于 Regaud 固定液固定 2 天,期间应更换 1 次固定液。
3、3%重酸钾固定 1 天。
4、流水冲洗 16 个小时或过夜。
5、照常规脱水、包埋。
6、切片厚度约为 5μm,常规脱蜡至水。
8、蒸馏水清洗 2 次,每次 1min。
9、放入含 Giemsa 工作液染缸,浸染 18-24h。
10、蒸馏水稍微清洗。
染色结果:

注意事项:
1、血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀,以免影响染色效果。
2、涂片染色中 Giemsa 染色后,切勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。
3、如果染色过深或过浅,应调整染色时间或工作液浓度。
4、涂片染色和组织切片染色中,pH 值对染色有一定影响,载玻片应清洁、无酸碱污染,以免影响染色效 果。
5、染色液经稀释后液面有金属光泽则表示染液有染色作用,否则染色液可能失效。
6、组织切片染色中,染色后需用大量 0.1-0.5%乙酸急速冲洗,避免浮面沉淀物污染切片后难以洗脱。
7、0.5%乙酸分化常用于 Giemsa 组织切片染色,如有必要亦可用于细胞涂片,但其浓度应适量下调。0.5% 乙酸分化切片时,切片呈粉红色即可终止。
8、Giemsa 组织切片染色中,无水乙醇脱水要迅速,否则切片易褪色。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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文献和实验频率。1.4 0.075 mol/L 氯化钾溶液5.59 g 氯化钾加蒸馏水至 1000 ml。 1.5 固定液甲醇: 冰醋酸为 3:1,临用前配制。1.6 姬姆萨 (Giemsa) 染液取姬姆萨染料 3.8 g ,置乳钵中,加少量甲醇研磨。逐渐加甲醇至 375 mL,待完全溶解后,再加 125 mL 甘油,放入 37° C 温箱中保温 48 h。保温期间振摇数次,使充分溶解。取出过滤,2 周后使用,作为姬姆萨染液原液。使用时, 取 1 份姬姆萨染液原液,与 9 份 1 / 15 mol
过硫酸胺 0.1 g ,加超纯水1.0 mL 溶解后,4 ℃ 保存,保存时间为 1 周。(-20 ℃长期保存) 30% 丙烯酰胺 溶于总体积为 50 mL 的水中,定容至 100 mL。室温保存于棕色瓶。 10× PBS(2L) NaOH 调 pH 值至 7.4,定容至 2 L。保存于室温。 还原型 5×SDS 上样缓冲液 混匀后,分装于 1.5 mL 离心管中,4 ℃ 可保存数周,-20 ℃ 可长期保存。 电泳液缓冲液 加蒸馏水溶解定容至 1000 mL 室温保存,1 次溶液可重复
姬姆萨染液由天青、伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。但本法对细胞核和寄生虫着色较好,结构显示更清晰,而胞质和中性颗粒则着色较差。STEP 1:将染色的玻片置于玻片架上,浸入盛有蒸馏水的染色缸中。1 个缸:pH 6.8 10 mmol/l 磷酸钠缓冲液,所配的 25 倍稀释的姬姆萨染液。3 个缸:蒸馏水。脱水系列溶液:①3 个缸:分别盛 50%、70% 和 95% 乙醇。②2 个缸:盛有无水乙醇。③3 个缸:盛有二甲苯。STEP 2:在 25 倍稀释的姬姆萨染液中染玻片 20 s
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