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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 亚型:
IgG
- 保存条件:
Store at -20 °C
- 克隆性:
多克隆
- 库存:
20-60
- 供应商:
上海博湖
- 应用范围:
详见说明书
- 浓度:
1mg/ml
- 抗体英文名:
详见说明书
- 规格:
100 ul
一抗和二坑的区别:
第一抗体就是平常所说的抗体,即能和抗原特异性结合。 第二抗体是能和抗体结合的,即抗体的抗体。主要用于检测抗体的存在。
一抗是针对抗原的抗体,二抗是针对一抗的抗体。即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体。也就是说,抗原进入机体刺激机体免疫系统产生免疫应答,由B细胞可以产生与相应抗原发生特异性结合的特殊蛋白质。
一抗二抗都是一种可以特异结合别的物质的基团,而且一抗可以至少结合两种其他基团(底物和二抗)。
一抗:可以特异结合底物,就是识别出我们想要检测的东西。
一抗和底物结合与否用肉眼是看不出来的。
二抗:可以和一抗结合,并带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),作用是检测一抗。 如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),则不需要二抗。但这样成本很高,因为一种一抗只识别一种底物。所以如今的设计一般是二抗带上可检测标记,再来检测一抗。而一抗识别底物。这样,当一抗结合到底物上,就可以通过二抗检测出来。
单抗制备过程:
1.提取合成专一性抗体的单个B淋巴细胞(不能在体外生长)。 2.应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,得到杂交瘤细胞。
3.对杂交瘤细胞进行细胞培养,选出所需要的细胞群,并进行克隆化培养,得到稳定的杂交瘤细胞,再进行大规模培养获得单克隆抗体。
4.提纯,一般常用金黄色葡萄球菌蛋白A-琼脂糖4B亲和层析法。
谷氨酸半胱氨酸γ合成酶抗体 Ceramide glucosyltransferase 0.1ml
细胞表面趋化因子受体3抗体 CXCR3 0.1ml
补体C2抗体 Complement C2 0.2ml
造血干细胞抗原CD133抗体 CD133 0.1ml
内毒素受体抗体 CD14 0.1ml
CD20抗体 CD20 0.1ml
CD24抗体 CD24 0.1ml
白介素2受体a链/IL-2RA抗体 IL2RA 0.1ml
B和T淋巴细胞衰减蛋白抗体 CD272 0.1ml
CD4抗体 CD4 0.1ml
CD44抗体 CD44 0.1ml
白细胞共同抗原抗体 CD45 0.1ml
CD5抗体 CD5 0.1ml
细胞间粘附分子-1抗体 ICAM1 0.1ml
神经细胞粘附分子1抗体 CD56 0.1ml
Sall4 (D16H12) Rabbit mAbL选择素抗体 CD62L 0.1ml
CD68抗体 CD68 0.1ml
6号染色体开放阅读框226抗体 C6orf226 0.2ml
间隙连接蛋白30抗体 connexin 30 0.1ml
2号染色体开放阅读框69抗体 C2orf69 0.2ml
3号染色体开放阅读框18抗体 C3orf18 0.2ml
巨噬细胞炎症因子1β /MIP-1β抗体 CCL4 0.1ml
细胞外基质金属蛋白酶诱导因子抗体 CD147 0.1ml
整合素αM/巨噬细胞表面分子抗体 CD11b 0.1ml
血小板内皮细胞黏附分子-1抗体 CD31 0.1ml
血小板内皮细胞黏附分子1抗体 CD31 0.1ml
CD34抗体 CD34 0.1ml
CD36抗体 CD36 0.1ml
凋亡加强结构域蛋白6抗体 CARD6 0.2ml
凋亡加强结构域蛋白17抗体 CARD17 0.2ml
凋亡加强结构域蛋白4抗体 CARD4 0.2ml
4号染色体开放阅读框34抗体 C4orf34 0.2ml
酪蛋白激酶1γ3/CKI γ3抗体 CKI gamma 3 0.2ml
凋亡加强结构域蛋白9抗体 CARD9 0.2ml
胆固醇氧化酶抗体 Cholesterol Oxidase 0.1ml
半胱胺酸蛋白酶蛋白14抗体 Caspase 14 0.1ml
半胱胺酸蛋白酶蛋白5抗体 Caspase 5 0.1ml
猪瘟病毒抗体 CSFV 0.1ml
猪瘟病毒抗体 CSFV 0.1ml
嗜铬粒蛋白C抗体 Chromogranin C/Sg II 0.2ml
型乙酰胆碱受体α10/AChRα10抗体 CHRNA10 0.2ml
型乙酰胆碱受体α6/AChRα6抗体 CHRNA6 0.2ml
型乙酰胆碱受体α9/AChRα9抗体 CHRNA9 0.2ml
型乙酰胆碱受体δ/AChRδ抗体 CHRND 0.2ml
凋亡加强结构域蛋白8抗体 CARD8 0.1ml
凋亡加强结构域蛋白7抗体 CARD7 0.1ml
β衣被蛋白抗体 beta COP 0.2ml
半胱胺酸蛋白酶4/11抗体 Caspase 4+Caspase 11 0.1ml
1号染色体开放阅读框187抗体 C1orf187 0.2ml
9号染色体开放阅读框61抗体 C9orf61 0.2ml
C末端结合蛋白2抗体 CTBP2 0.1ml
21号染色体开放阅读框13抗体 C21ORF13 0.2ml
冠蛋白3抗体 Coronin 3 0.2ml
细胞周期蛋白N端结构域蛋白1抗体 CNTD 0.2ml
胆固醇25羟化酶抗体 CH25H 0.2ml
天冬氨酸-胱氨酸特异性蛋白酶家族抗体 Caspase-1 p20 0.1ml
钙营养蛋白1/钙结合蛋白8抗体 Calneuron 1 0.2ml
CD27抗体 CD27 0.2ml
CD30抗体 CD30 0.1ml实验原理 :
(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。
(2)活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。 (3)结合细胞:不同类别的免疫球蛋白,可结合不同种的细胞,参与免疫应答。
(4)可通过胎盘及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。 小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。 4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。 5. 免疫血清的保存
建议将分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
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文献和实验:使用 Anti-phospho-Akt (Ser473) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌组织进行免疫组织化学分析。(图 A)使用免疫组化试剂盒M&R HRP/DAB Detection IHC Kit,抗体 1:100 稀释;(图 B) 采用普通免疫组化试剂盒,抗体 1:25 稀释。 图 6 免疫组化实验检测 Erk1/2 表达 注:使用 Anti-Erk1/2 Mouse mAb与p44/42 MAPK (Erk1/2)Rabbit mAb 对正常小鼠心脏组织进行免疫
(Ser473)(193H12)Rabbit mAb,1:300,稀释,二抗是驴抗兔,1:2000,我是实验室的新手,刚呆俩月,受 此挫折,一头雾水,请过来人或者有经验的同学帮忙解答怎样解决,非常感谢! 碧峤 pAkt有两个位点,Ser473和Thr308,其中Ser473相对容易显色。如果显色失败,可能的原因:1 上样量过少,我们一般都是30μg;2 一抗孵育时间过短,我们一般24h~48h;3 一抗是否工作有待排除 米宝
h)即可。2. 修复大法——不仅仅是「煮一煮」微波炉修复:简单易行效果好,CST 推荐使用微波炉完成修复。合适的修复液:根据抗体说明书使用合适的修复液。用柠檬酸修复后,切片需浸泡在修复液中,自然冷却;而用 EDTA 修复后,切片可直接从修复缸中取出,直接进行下一步。注:使用不同的修复方式和不同生产商的抗体检测人肺癌组织中 EGFR 的表达。第一排为 CST 的 EGF Receptor (D38B1) XP® Rabbit mAb(#4267),EDTA 的修复方式明显优于柠檬酸盐及胃蛋白
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