定量PCR封板膜

定量PCR简介

PCR反应通过变性、退火、延伸三个循环步骤，使目标DNA片段曾指数扩增。 因此，PCR系统是一个极其灵敏的信号放大系统，能将极微弱、甚至是单拷贝的基因信号检测出来。 但是常规的PCR不能反映起始样本中目的基因的含量水平，从而限制了它在临床检测中的应用。 荧光定量PCR是指通过实时监控PCR体系中的荧光信号，对样本中初始模板进行定量分析的一项新技术。定量PCR可实时检测产物量，通过加入已知浓度的标准样品绘制标准曲线，然后根

内参照定量PCR

内参照定量PCR PCR可分析极微量的DNA，并可同时扩增多种序列，已应用于基因转录水平的研究。尽管PCR是一种较理想的核酸定量方法，但实验方案的选择对PCR定量的成功与否极为重要，因为PCR是一个指数过程，控制反应率的任一参数的微小变化都会显著影响产物的生成量，在这些参数被精确优化与控制后，也还可能出现不同反应管中的产物量的差异，而导致结果的偏差。 设置内参照是理想的定量方法，它使定量测定mRNA工作变得较为简单易行，这一类方法已较为广泛地应用，下面介绍两种常用的方法

荧光定量PCR概述

聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）是体外扩增核酸片段的基因检测技术，具有简便易行、灵敏度高等特点。传统的PCR定量是应用终点PCR来对样品中的模板量进行定量，通常用凝胶电泳分离，并用荧光染料来检测PCR反应的最终扩增产物。但是普通PCR扩增已经满足不了分子生物学的研究，荧光定量PCR（Flurogenic Quantitative Polymerase ChainReaction，QPCR）技术实现了PCR从定性到定量的飞跃，以其快速、特异性强、重复