布氏布氏锥虫探针法荧光定量PCR试剂盒

布氏布氏锥虫探针法荧光定量PCR试剂盒需要自备的器材：
1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水 处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。

特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。
使用方法：
注：所有试剂使用前需完全解冻，混合均匀，6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理（样本处理区）
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等，具体提取方法请参照相关说明书；阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直接使用。
2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）
取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s，转移至样本处理区。 2.加样（样本处理区） 3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。

环指蛋白75抗体    进口/国产    英文名称：    RNF75
RIT1蛋白抗体    进口/国产    英文名称：    RIT1
环指蛋白19B抗体    进口/国产    英文名称：    RNF19B
胰岛β细胞生长因子抗体    进口/国产    英文名称：    Reg3a
环指蛋白149抗体    进口/国产    英文名称：    RNF149
心脏蛋白磷酸酶1结合蛋白/环指蛋白158抗体    进口/国产    英文名称：    RNF158
环指蛋白180抗体    进口/国产    英文名称：    RNF180
环指蛋白123抗体    进口/国产    英文名称：    RNF123
软骨肉瘤相关蛋白2抗体    进口/国产    英文名称：    RED
环指蛋白210抗体    进口/国产    英文名称：    RNF210
环指蛋白23抗体    进口/国产    英文名称：    RNF23
环指蛋白24抗体    进口/国产    英文名称：    RNF24
环指蛋白25抗体    进口/国产    英文名称：    RNF25
环指蛋白31抗体    进口/国产    英文名称：    RNF31
环指蛋白34抗体    进口/国产    英文名称：    RNF34
环指蛋白21抗体    进口/国产    英文名称：    RNF21
环指蛋白190抗体    进口/国产    英文名称：    RNF190
胆碱酯酶抑制剂8抗体    进口/国产    英文名称：    RIC8A
神经元突触膜胞外分泌调节蛋白1抗体    进口/国产    英文名称：    ABCA4
神经元突触膜胞外分泌调节蛋白2抗体    进口/国产    英文名称：    RIM2
环指蛋白130抗体    进口/国产    英文名称：    RNF130
布氏布氏锥虫探针法荧光定量PCR试剂盒RNA结合蛋白26抗体    进口/国产    英文名称：    RBM26
环指蛋白32抗体    进口/国产    英文名称：    RNF32
环指蛋白189抗体    进口/国产    英文名称：    RING finger protein 189
E3泛素蛋白连接酶144B/环指蛋白144B抗体    进口/国产    英文名称：    RNF144B
RNA结合蛋白20抗体    进口/国产    英文名称：    RBM20
环指蛋白215抗体    进口/国产    英文名称：    RNF215
环指蛋白187抗体    进口/国产    英文名称：    RNF187
磷酸化指状蛋白RET抗体    进口/国产    英文名称：    Phospho-Ret (Tyr1062)
骨保护蛋白配体抗体(破骨细胞分化因子)    进口/国产    英文名称：    RANKL
磷酸化成视网膜细胞瘤抑癌蛋白抗体    进口/国产    英文名称：    phospho-Rb (Ser780)
G蛋白信号转导调节因子2抗体    进口/国产    英文名称：    RGS2
核受体RXRα抗体    进口/国产    英文名称：    Retinoid X receptor
Rho相关蛋白激酶1抗体    进口/国产    英文名称：    ROCK1
环指蛋白156抗体    进口/国产    英文名称：    RNF156
RRAD抗体    进口/国产    英文名称：    RRAD
Runx3抗体    进口/国产    英文名称：    Runx3
Rad51抗体    进口/国产    英文名称：    Rad51
维甲酸受体RAR α/RAR α抗体    进口/国产    英文名称：    RAR alpha
维甲酸受体β抗体    进口/国产    英文名称：    RAR Beta
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以最低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。