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- 保存条件:
低温冷藏
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
Schistosoma spindale
- 库存:
36
- 供应商:
上海谷研
- 规格:
50T
剪切和多聚腺苷酸化特异性因子4抗体 现货供应 英文名称: CPSF4
组织蛋白酶E抗体 现货供应 英文名称: Cathepsin E
紧密连接蛋白5抗体 现货供应 英文名称: Claudin 5
细胞分化周期CDC42相互作用蛋白4抗体 现货供应 英文名称: Cip4
细胞周期蛋白依赖性激酶样3抗体 现货供应 英文名称: CDKL3
杀菌肽/天蚕抗菌肽单克隆抗体 现货供应 英文名称: Cecropin
第十七号染色体开放阅读框87抗体 现货供应 英文名称: C17orf87
降钙素受体抗体 现货供应 英文名称: Calcitonin receptor
补体C2a链多肽抗体 现货供应 英文名称: C2a
CD80抗体 现货供应 英文名称: CD80
CD19抗体 现货供应 英文名称: CD19
C-C元件趋化因子26抗体 现货供应 英文名称: CCL26
5号染色体开放阅读框22抗体 现货供应 英文名称: C5orf22
钙激活氯离子通道4蛋白抗体 现货供应 英文名称: CLCA4
嗜酸粒细胞趋化蛋白3抗体 现货供应 英文名称: CCL26 Signal peptide
嗜酸粒细胞趋化蛋白3抗体 现货供应 英文名称: CCL26
趋化素抗体 现货供应 英文名称: chemerin
5号染色体开放阅读框55抗体 现货供应 英文名称: C5orf55
细胞表面趋化因子受体7抗体 现货供应 英文名称: CXCR7
细胞色素c氧化酶7A2抗体 现货供应 英文名称: COX7A2
CD36抗体 现货供应 英文名称: CD36
醛固酮合成酶CYP11B2抗体 现货供应 英文名称: CYP11B2
7号染色体开放阅读框16抗体 现货供应 英文名称: C7orf16
10号染色体开放阅读框62抗体 现货供应 英文名称: C10orf62
梭形血吸虫探针法荧光定量PCR试剂盒胃癌多药耐药相关蛋白 现货供应 英文名称: CAPRIN2
酪蛋白激酶casein kinase Iα抗体 现货供应 英文名PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
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文献和实验相关专题 实验室很多同学都要做Real time PCR实验,实验室的师兄师姐都会有很多宝贵意见,不过也有实验室前没有做过的,查找了下资料和大家分享下关于实时荧光 Taqman 探针设计、实时荧光PCR探针的选择、引物的设计及评价。 荧光探针法是用序列特异的荧光标记探针来检测产物,探针法的出现使得定量PCR技术的特异性比常规PCR技术大大提高。目前较常提及的有TaqMan探针、FRET杂交 探针(荧光共振能量传递探针)和分子
所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
上的DNA定量。这是DNA定量技术的一次飞跃。 根据最终得到的数据不同,定量PCR可以分为相对定量和绝对定量两种。典型的相对定量如比较经过不同方式处理的两个样本中基因表达水平的高低变化,得到的结果是百分比;绝对定量则需要使用标准曲线确定样本中基因的拷贝数或浓度。根据所使用的技术不同,荧光定量PCR又可以分为TaqMan探针和SYBR Green I荧光染料两种方法。比较而言,探针杂交技术在原理上更为严格,所得数据更为精确;荧
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