蒙得维的沙门氏菌探针法荧光定量PCR试剂盒

蒙得维的沙门氏菌探针法荧光定量PCR试剂盒需要自备的器材：
1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水 处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。

ALAD
肌萎缩侧索硬化症相关蛋白4抗体    现货供应    英文名称：    ALS2CR4
α2巨球蛋白抗体    现货供应    英文名称：    alpha 2 Macroglobulin
ACCSL蛋白抗体    现货供应    英文名称：    ACCSL
甲胎蛋白抗体    现货供应    英文名称：    AFP
β淀粉样前体蛋白结合蛋白3抗体    现货供应    英文名称：    Mint3
星形肌动蛋白抗体    现货供应    英文名称：    ASTN2
系统性红斑狼疮相关蛋白TREX1抗体    现货供应    英文名称：    TREX1
磷酸化系统性红斑狼疮先关蛋白TREX1抗体    现货供应    英文名称：    phospho-ATRIP 
磷酸化系统性红斑狼疮相关蛋白TREX1抗体    现货供应    英文名称：    Phospho-ATRIP 
接头相关蛋白复合体AP-2μ链1抗体    现货供应    英文名称：    AP2M1
磷酸化接头相关蛋白复合体AP-2μ链1抗体    现货供应    英文名称：    Phospho-AP2M1 
膜粘连蛋白7抗体    现货供应    英文名称：    Annexin A7
3号染色体开放阅读框15抗体    现货供应    英文名称：    C3orf15
载脂蛋白B受体抗体    现货供应    英文名称：    APOB48R
三磷酸腺苷结合盒转运蛋白2抗体    现货供应    英文名称：    ABCA2
载脂蛋白B抗体    现货供应    英文名称：    ApoB 
花生四烯酸15脂氧合酶2抗体    现货供应    英文名称：    ALOX15B
载脂蛋白C4抗体    现货供应    英文名称：    APOC4
低密度脂蛋白受体衔接蛋白抗体    现货供应    英文名称：    ARH
原始广泛存在蛋白1抗体    现货供应    英文名称：    AUP1
锚蛋白重复结构域蛋白37抗体    现货供应    英文名称：    ANKRD37
α1,4-半乳糖基转移酶1    现货供应    英文名称：    A4GALT
血管紧张素Ⅱ受体相关蛋白抗体    现货供应    英文名称：    AGTRAP
膜粘连蛋白2受体抗体    现货供应    英文名称：    AX2R
血管紧张素1转换酶抑制剂抗体    现货供应    英文名称：    ACEI
拮抗凋亡转录因子抗体    现货供应    英文名称：    AATF
特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。
使用方法：
注：所有试剂使用前需完全解冻，混合均匀，6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理（样本处理区）
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等，具体提取方法请参照相关说明书；阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直接使用。
2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）
取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s，转移至样本处理区。 2.加样（样本处理区） 3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。

蒙得维的沙门氏菌探针法荧光定量PCR试剂盒反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以最低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。