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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温冷藏
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
Salmonella hadar
- 库存:
36
- 供应商:
上海谷研
- 规格:
50T
1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
C1/BNaC2/ASIC1A
双链RNA腺苷酸脱氨基酶抗体 现货供应 英文名称: ADAR1
髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗体 现货供应 英文名称: AF10
腺苷酸环化酶1抗体 现货供应 英文名称: ADCY1
腺瘤样息肉抗体 现货供应 英文名称: APC
溶血磷脂酰基转移酶抗体 现货供应 英文名称: AGPAT1
锚蛋白重复及SAM结构域蛋白3抗体 现货供应 英文名称: ANKS3
磷酸化间变型淋巴瘤激酶抗体 现货供应 英文名称: phospho-ALK
酰基辅酶A脱氢酶很长链抗体 现货供应 英文名称: ACADVL
信号转导衔接结合蛋白抗体 现货供应 英文名称: AMSH
锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族3抗体 现货供应 英文名称: ASB3
有丝分裂激酶B抗体 现货供应 英文名称: Aurora C
磷酸化Ack1抗体 现货供应 英文名称: Phospho-Ack1
磷酸化Ack1抗体 现货供应 英文名称: Phospho-Ack1
磷酸化β抑制蛋白1抗体 现货供应 英文名称: Phospho-beta-Arrestin 1
磷酸化有丝分裂激酶A抗体 现货供应 英文名称: Phospho-Aurora A
磷酸化APS抗体 现货供应 英文名称: phospho-APS
有丝分裂激酶A抗体 现货供应 英文名称: Aurora A
干扰素诱导蛋白AIM2抗体 现货供应 英文名称: AIM2
水通道蛋白-2抗体 现货供应 英文名称: Aquaporine 2
肿瘤抑制基因ABI2/精氨酸酪氨酸蛋白激酶结合蛋白抗体 现货供应 英文名称: ABI2
哈达尔沙门氏菌探针法荧光定量PCR试剂盒ADP核糖基化因子样11抗体 现货供应 英文名称: ARL11
ARM重复X连锁蛋白ARMCX3抗体 现货供应 英文名称: ARMCX3
ARM重复X连锁蛋白ARMCX1抗体 现货供应 英文名称: ARMCX1
ARM重复X连锁蛋白ARMCX2抗体 现货供应 英文名称: ARMCX2
自噬相关蛋白10抗体 现货供应 英文名称: Apg10
酰基辅酶A结合结构域蛋白6抗体 现货供应 英文名称: ACBD6
特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。 2.加样(样本处理区) 3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
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文献和实验相关专题 实验室很多同学都要做Real time PCR实验,实验室的师兄师姐都会有很多宝贵意见,不过也有实验室前没有做过的,查找了下资料和大家分享下关于实时荧光 Taqman 探针设计、实时荧光PCR探针的选择、引物的设计及评价。 荧光探针法是用序列特异的荧光标记探针来检测产物,探针法的出现使得定量PCR技术的特异性比常规PCR技术大大提高。目前较常提及的有TaqMan探针、FRET杂交 探针(荧光共振能量传递探针)和分子
所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
缺陷个体。根据国际惯例,要求对易受沙门氏菌污染的食品进行分类管理,以使大多数食物不含沙门氏菌,从而有效预防沙门氏菌病。为此,人们在探索沙门氏菌检测方法的过程中,作出了不懈的努力,现将有关进展报告如下,并介绍两种快速检测沙门氏菌的试剂盒。 自19世纪后期,沙门氏菌首次被鉴定为人类的一种病原以来,检测方法学都是建立在采取感染病人的粪便或血液作为临床病料的基础上。此后的60年间,用于从食品中分离沙门氏菌的方法实质上与那些用于临床病料的方法是相同的。但至少有三个因素限制了用于
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