黑色普雷沃菌探针法荧光定量PCR试剂盒

黑色普雷沃菌探针法荧光定量PCR试剂盒需要自备的器材：
1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水 处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。

肺表面活性蛋白C抗体    进口/国产    英文名称：    SP-C
5-羟色胺受体1D抗体    进口/国产    英文名称：    5HT1D Receptor
5-羟色胺受体1E抗体    进口/国产    英文名称：    5HT1E Receptor
5-羟色胺受体1F抗体    进口/国产    英文名称：    5HT1F Receptor
5-羟色胺受体2A抗体    进口/国产    英文名称：    5HT2A Receptor
5-羟色胺受体2B抗体    进口/国产    英文名称：    5HT2B Receptor
5-羟色胺受体3A抗体    进口/国产    英文名称：    5HT3A Receptor
5-羟色胺受体3D+3E抗体    进口/国产    英文名称：    5HT3D + 5HT3E Receptor
5-羟色胺受体3D抗体    进口/国产    英文名称：    5HT3D Receptor
5-羟色胺受体4抗体    进口/国产    英文名称：    5HT4 Receptor
5-羟色胺受体5A抗体    进口/国产    英文名称：    5HT5A receptor
5-羟色胺受体7抗体    进口/国产    英文名称：    5HT7 Receptor
SCEL蛋白抗体    进口/国产    英文名称：    SCEL
精子相关抗原8抗体    进口/国产    英文名称：    SPAG8
T淋巴细胞识别的鳞状细胞癌抗原抗体    进口/国产    英文名称：    SART1
S100A2抗体    进口/国产    英文名称：    S100 alpha 2
细胞周期G2/M期快速诱导蛋白SPDYA抗体    进口/国产    英文名称：    SPDYA
5-羟色胺受体6抗体    进口/国产    英文名称：    5HT6 Receptor
ATP依赖解旋酶SMARCA2抗体    进口/国产    英文名称：    SMARCA2
S期激酶相关蛋白1抗体    进口/国产    英文名称：    SKP1
SHFM3蛋白抗体    进口/国产    英文名称：    SHFM3
硫氧还蛋白1抗体    进口/国产    英文名称：    SRXN1
信号转导衔接蛋白1抗体    进口/国产    英文名称：    STAM
磷酸化酪氨酸蛋白激酶Fyn/同步原癌基因抗体    进口/国产    英文名称：    phospho-SLK (Tyr530)
丝氨酸棕榈酰转移酶2抗体    进口/国产    英文名称：    SPTLC2
磷酸化细胞信号转导分子SMAD3抗体    进口/国产    英文名称：    Phospho-Smad3 (Ser425)
磷酸化细胞信号转导分子SMAD3抗体    进口/国产    英文名称：    Phospho-Smad3 (Ser208)
磷酸化细胞信号转导分子SMAD2抗体    进口/国产    英文名称：    Phospho-Smad2(Thr220)
磷酸化核突触蛋白α抗体    进口/国产    英文名称：    phospho-Alpha synuclein (Tyr125)
磷酸化核突触蛋白α抗体    进口/国产    英文名称：    phospho-Alpha synuclein(Ser129)
磷酸化神经突触素1抗体    进口/国产    英文名称：    phospho-SYN1(Ser549)
磷酸化神经突触素1抗体    进口/国产    英文名称：    phospho-SYN1(Ser603) 
黑色普雷沃菌探针法荧光定量PCR试剂盒磷酸化神经突触素1抗体    进口/国产    英文名称：    phospho-SYN1(Ser62+Ser67)
磷酸化神经突触前膜胞内蛋白抗体    进口/国产    英文名称：    phospho-STXBP1 (Ser515)
组蛋白甲基转移酶SMYD3抗体    进口/国产    英文名称：    SMYD3
滑膜肉瘤X断点蛋白8抗体    进口/国产    英文名称：    SSX8
磷酸化信号转导和转录激活因子6抗体    进口/国产    英文名称：    phospho-STAT6(Thr645)
磷酸化原癌基因蛋白18    进口/国产    英文名称：    Phospho-Stathmin(Ser25)
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶38抗体    进口/国产    英文名称：    STK38
分选连接蛋白1抗体    进口/国产    英特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。
使用方法：
注：所有试剂使用前需完全解冻，混合均匀，6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理（样本处理区）
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等，具体提取方法请参照相关说明书；阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直接使用。
2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）
取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s，转移至样本处理区。 2.加样（样本处理区） 3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。

反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以最低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。