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- 保存条件:
低温冷藏
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
Plasmodium malariae
- 库存:
36
- 供应商:
上海谷研
- 规格:
50T
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
称: Bak(BCL2 homologous antagonist/killer)
合成酶-1(抗原) 进口/国产 英文名称: NOS-1(bNOS:neuronal NOS:nNOS:Nitric Oxide synthase-1)
合成酶-2(抗原) 进口/国产 英文名称: NOS-2 (iNOS) Nitric Oxide Synthase,Inducible
蛇毒巴曲酶抗原 进口/国产 英文名称: Batroxobin
合成酶-3(抗原) 进口/国产 英文名称: NOS-3 (eNOS) endotheli cell NOS
神经肽 Y(抗原) 进口/国产 英文名称: NPY ( Neuropeptide Y)
谷氨酸受体(抗原) 进口/国产 英文名称: NR2B (Glutamate receptor)
神经生长因子-3(抗原) 进口/国产 英文名称: NT-3
神经生长因子4/5(抗原) 进口/国产 英文名称: NT-4,NT-5
神经生长因子(抗原) 进口/国产 英文名称: NTN (Neurturin)
Bcl-xL蛋白抗原 进口/国产 英文名称: Bcl-xL(human, mo, rat, bovine, dog, pig, sheep, horse)
磷酸化(Ser62)Bcl-xL蛋白抗原 进口/国产 英文名称: phospha-Bcl-xL (pSer62) peptide (human, mo, rat, bovine, dog, pig, sheep, horse)
丁酰胆碱脂酶抗原(N端) 进口/国产 英文名称: BCHE(butyrylcholinesterase)NT
丁酰胆碱脂酶抗原(C端) 进口/国产 英文名称: BCHE(butyrylcholinesterase)CT
核受体相关因子-1(抗原) 进口/国产 英文名称: Nurr1
胞浆-5′-核苷酸酶-Ⅱ 进口/国产 英文名称: NT5C2
三日疟原虫探针法荧光定量PCR试剂盒一种抑癌基因(多肽) 进口/国产 英文名称: BECN1(Beclin1)
成骨生长肽 (骨生长激素肽)(蛋白多肽) 进口/国产 英文名称: OGP (Ostegenic Growth Peptide)
骨桥蛋白(多肽抗原) 进口/国产 英文名称: OPN
TNF家族B细胞激活因子抗原 进口/国产 英文名称: BAFF/CD257(B cell activating factor)
肿瘤抑制基因(抗原) 进口/国产 英文名称: P53
腺苷酸环化酶激活肽-27/38(抗原) 进口/国产 英文名称: PACAP-27/38
腺苷酸环化酶激活肽-38(抗原) 进口/国产 英文名称: PACAP-38
BH3结构域凋亡诱导蛋白抗原 进口/国产 英文名称: Bid (BH3 interacting domain death agonist)
腺苷酸环化酶激活肽6-38 进口/国产 英文名称: PACAP(6-38 Peptide)
腺苷酸环化酶激活肽/血管活性肠肽受体(抗原) 进口/国产 英文名称: PACAP/VIP receptor
腺苷酸环化酶激活肽受体(抗原) 进口/国产 英文名称: PACAP receptor-I
关节炎相关基因 进口/国产 英文名称: PADI4 (HL-60 PAD)(Protein-arginine deiminase type IV,PADI 4,PAD I4 )其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
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所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
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