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- 保存条件:
低温冷藏
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
Lamp kit for Salmonella paratyphi C
- 库存:
36
- 供应商:
上海谷研
1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。 2.加样(样本处理区) 3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
内皮细胞受体蛋白酪氨酸激酶抗体 进口/国产 英文名称: EphA2
酪氨酸蛋白激酶受体B2抗体 进口/国产 英文名称: EphB2 R
磷酸化雌激素受体ER alpha 抗体 进口/国产 英文名称: Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser167)
重组增强型绿色荧光蛋白抗体 进口/国产 英文名称: EGFP
雌激素受体α抗体(用于western blot) 进口/国产 英文名称: ER-Alpha
雌激素受体α/β抗体 进口/国产 英文名称: Estrogen Receptor alpha + beta
自分泌运动因子抗体 进口/国产 英文名称: Anei-ENPP2
酪氨酸蛋白激酶A3受体抗体 进口/国产 英文名称: Ephrin A3
EHM2蛋白抗体 进口/国产 英文名称: EHM2
磷酸化真核翻译起始因子4E抗体 进口/国产 英文名称: phospho-eIF4E (Ser209)
翻译延伸因子EF-1a抗体 进口/国产 英文名称: eEF1A1
磷酸化雌激素受体α抗体 进口/国产 英文名称: Phospho-Estrogen Receptor alpha (Tyr537)
磷酸化表皮生长因子受体抗体 进口/国产 英文名称: phospho-EGFR (Tyr1068)
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1抗体 进口/国产 英文名称: phospho-Erk1 (Thr202 + Tyr204)
丙型副伤寒沙门氏菌LAMP试剂盒磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体 进口/国产 英文名称: phospho-ERK1 (Thr202/Tyr204) + ERK2 (Thr183/Tyr185)
酪氨酸蛋白激酶受体B4抗体 进口/国产 英文名称: EPHB4
酪氨酸蛋白激酶A5受体抗体 进口/国产 英文名称: Ephrin A5
上皮钠离子通道蛋白γ/γENaC抗体 进口/国产 英文名称: epithelial Sodium Channel gamma
癌基因ETS2抗体 进口/国产 英文名称: ETS2
内皮素3抗体 进口/国产 英文名称: Endothelin 3
磷酸化细胞外信号调节激酶5抗体 进口/国产 英文名称: phospho-ERK5 (Ser496)
磷酸化细胞外信号调节激酶5抗体 进口/国产 英文名称: phospho-ERK5 ( Ser731+Thr733)
细胞外信号调节激酶4抗体 进口/国产 英文名称: ERK4
肠出血性大肠杆菌埃希氏菌O157:H7抗体 进口/国产 英文名称: E.coli O157:H7
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶ERK抗体 进口/国产 英文名称: phospho-ERK1 (Thr202+Tyr204) + ERK2 (Thr185+Tyr187)
CD312抗体 进口/国产 英文名称: EMR2
eIF4E结合蛋白抗体 进口/国产 英文名称: eIF4EBP1
磷酸化表皮生长因子受体抗体 进口/国产 英文名称: Phospho-EGFR (Ser1045)
磷酸化表皮生长因子受体抗体 进口/国产 英文名称: Phospho-EGFR (Tyr1138)
肝配蛋白A1受体抗体 进口/国产 英文名称: Ephrin A1 Receptor
真核翻译起始因子2C2抗体 进口/国产 英文名称: eIF2C2
眼睛发育缺失蛋白EYA2抗体 进口/国产 英文名称: EYA2
EYA4蛋白抗体 进口/国产 英文名称: EYA4
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
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文献和实验产酸产气。 1880 年 eberth 首先发现伤寒杆菌, 1885 年 salmon 分离到猪霍乱杆菌,由于 salmon 发现本属细菌的时间较早,在研究中的贡献较大,遂定名为沙门氏菌属。目前至少有 67 种 o 抗原和 2000 个以上血清型,所致疾病称沙门氏菌病。根据其对宿主的致病性,可分为三类:①对人致病;②对人和动物均致病;③对动物致病。 与人类关系密切的沙门氏菌有:伤寒沙门氏菌( s.typhi ),甲、乙、丙型副伤寒
释放酶活;一类是抗体法修饰的热启动酶,如 Champagne Taq ,预变性 95℃30s 即可释放酶活。使用时注意预变性时间,方能获得满意的扩增效果。 2. 选择 Lamp 扩增长片段 大于 5Kb 的长片段又该如何扩增呢?如果实验对保真度的需求不高,那么就可以使用 LAmp DNA 聚合酶。其保真度是 Taq 酶的 6 倍,可扩增超过 20Kb 的基因组、cDNA 片段,对于低拷贝、低纯度、以及不同 GC 含量的模板都具有很高的成功率。 3. 选择高保真酶快速高效扩增 如果实
清型,所致疾病称沙门氏菌病。根据其对宿主的致病性,可分为三类:①对人致病;②对人和动物均致病;③对动物致病。 与人类关系密切的沙门氏菌有:伤寒沙门氏菌(S.typhi),甲、乙、丙型副伤寒沙门氏菌(S.paratyphiA、B、C),鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium),猪霍乱沙门氏菌(S.choleraesuis),肠炎沙门氏菌(S.enteritidis)等十余种。一般可简称伤寒杆菌,甲、乙、丙型副伤寒杆菌,鼠伤寒杆菌,猪霍乱杆菌,肠炎杆菌。 一、生物学性状
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