样品实验方案
简要概述
1.用测试化合物(200μL/样品)制备细胞
2.添加Apopxin Green检测溶液
3.在室温下孵育20-60分钟
4.使用FL1通道的流式细胞仪分析细胞(Ex / Em = 490/525 nm)
操作步骤
1.用测试化合物处理细胞一段所需的时间(用喜树碱处理的Jurkat细胞4-6小时)以诱导细胞凋亡。注意:对粘附细胞的Apopxin 结合流式细胞术分析不是常规检测,因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。然而,Casiola-Rosen等人先前报道了利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。
2.离心细胞,得到1-5×105个细胞/管。
3.将细胞重悬于200μL测定缓冲液(组分B)中。
4.将2μLApopxin Green(组分A)加入细胞中。
5.可选:将2μL100X碘化丙啶(组分C)加入细胞中,用于坏死细胞。
6.在室温下孵育20至60分钟,避光。
7.可选:在使用流式细胞仪分析细胞之前,添加200至300μL的测定缓冲液(组分B)以增加体积。
8.使用具有FL1通道的流式细胞仪(Ex / Em = 490 / 525nm)监测荧光强度。当碘化丙啶加入细胞时,使用FL2通道测量细胞活力。
数据分析
在活的非凋亡细胞中,Apopxin Green检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡,其通常为所有细胞的2-6%。 在凋亡细胞中,Apopxin Green与磷脂酰丝氨酸结合,磷脂酰丝氨酸位于细胞膜的外部小叶上,导致染色强度增加。
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Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 蓝色荧光,适合微孔板检测 |
100 Tests |
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Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 绿色荧光,适合微孔板检测 |
100 Tests |
2823 |
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Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 红色荧光,适合微孔板检测 |
100 Tests |
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Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 深红色荧光,适合微孔板检测 |
100 Tests |
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Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 橙色荧光,适合酶标仪检测 |
100 Tests |
2823 |
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Cell Meter 磷脂酰丝氨酸细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光 适合于流式细胞检测 |
100 Tests |
2823 |
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Cell Meter 磷脂酰丝氨酸细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光 适合于流式细胞检测 |
100 Tests |
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Cell Meter 磷脂酰丝氨酸细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光 405nm激发 |
100 Tests |
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Cell Meter 磷脂酰丝氨酸细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光 405nm激发 |
100 Tests |
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