10%SDS-PAGE凝胶制备试剂盒(7.5mm)
中文名:10%SDS-PAGE凝胶制备试剂盒(7.5mm)
英文名:10% SDS-PAGE Gel Preparation Kit
CAS:N/A
级别:N/A
分子量:N/A
分子式:N/A
纯度:N/A
储存条件:RT
产品简介
产品组成:
注意:
1:过(APS)为固体粉末,使用前配制成10% APS溶液(0.1 g APS加1ml双蒸水)。APS溶液最好现配现用,通常4℃可保存两周。如干粉出现严重结块,可能变质,请联系厂家更换APS。
2:制胶液不需要添加TEMED可以达到常规聚合速度。如果需要加快聚合,可以适当加入TEMED。参考加入比例为0.001 mL / mL制胶液。
产品简介:
1:每种浓度的凝胶制备试剂盒只可用于单一分离胶浓度的SDS-PAGE胶的制备;
2:无需自备试剂,按比例加入APS后即可灌胶。
操作步骤:
根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度,最佳胶浓度请参考附表1。
一、灌制分离胶
1.参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。
2.注:加入上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触,是否加入上层筛板可根据实际情况选择。
3.按照 0.04 mL 10% APS溶液/ 4mL 分离胶制胶液的比例配置分离胶溶液,吹打混匀。
4.在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于 mini- gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端 1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可,然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-5 cm的水层,使凝胶表面保持平整。
5.静置30-60分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,表面凝胶已聚合。
注意:分离胶溶液剩余未灌注部分,可用于对照检测分离胶是否聚合
二、灌制浓缩胶
1.去除覆盖在分离胶上的水层。
2.按照 0.01 mL 10% APS溶液/ 1 mL 浓缩胶制胶液的比例配置浓缩胶溶液,吹打混匀。
3. 将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
4.将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
6.静置10~20分钟,等待浓缩胶聚合。
7.待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔。
8.进行常规电泳操作。
注意:浓缩胶溶液剩余未灌注部分,可用于对照检测浓缩胶是否聚合。
注意事项:
1. APS溶液不稳定,每次取用后立即放回冰箱,以防失效;若发现凝胶聚合时间延长,应考虑更换10% APS。
2. PAGE凝胶的凝聚速度受温度影响,室温较低是,可以增加50%-100%的APS使用量。
3. 在凝胶配制过程中,尤其是液体混匀步骤,应尽量避免气泡的产生。
4. 在分离胶上层加蒸馏水时要小心操作,加水时速度不能太快。
5. 具有神经毒性,操作时请穿戴实验服和一次性手套。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!