- ￥488
- 信裕生物
- XYD231
- 中国
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Bacteria gDNA Extract Kit
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海信裕生物科技有限公司
- 保存条件：
RT
- 规格：
50T
中文名:细菌基因组DNA快速提取试剂盒
英文名:Bacteria gDNA Extract Kit
CAS:N/A
级别:N/A
分子量:N/A
分子式:N/A
纯度:N/A
储存条件:RT
产品简介产品介绍：
信裕生物细菌基因组DNA快速提取试剂盒不含巯基乙醇等刺激性试剂，对人体无害。
对于革兰氏阴性菌可以在30min内完成实验，对于阳性菌可以在1h之内完成实验。
提取的DNA OD260/280 一般在 1.8 以上，可直接用于 PCR、酶切、杂交等实验。
注意事项：
1. 裂解液I 和纯化液II 容易产生沉淀，纯化液II 比较粘稠，用前均需要放置在 65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低，用前充分摇匀。
2. 自备试剂：氯仿。
操作步骤：
一. 对革氏阴性细菌样品（无需溶菌酶）。
1. 将 0.1-1.5 mL 过夜培养的菌液转移到 1.5 mL 塑料离心管中，12,000 rpm室温离心 1 min沉淀细菌，弃上清。
2. 加入 300 μL 预热的裂解液I 到细菌沉淀中，充分吹打均匀。
3. 再加入 150 μL 预热的纯化液II 到离心管中，颠倒数次混匀。此时溶液中可能有白色丝状悬浮物产生。由于纯化液II比较粘稠，可以采取称量方法取用，150 μL 约等于 150-160 mg。也可以将 1 mL 枪头剪去一截再吸取。
4. 65℃放置 3-5 min。如果室温放置，DNA 产量会降低 10-20%。
5. 加入 200 μL自备氯仿，震荡混匀 10-30 秒，此时溶液将呈乳白色。
6. 12,000 rpm 室温离心 2 min。此时上清液将变得透明，中间层有白膜。小心转移上清液到一个新的 1.5 mL 塑料离心管中，避免触及中间层的白膜。
7. 加入 1.5 倍体积(约 0. 7 mL)的结合液III，颠倒混匀后全部转移到离心吸附柱中，室温放置至少 2 min。
8. 12,000 rpm 室温离心 1 min，DNA 将吸附在离心吸附柱的膜上，弃掉收集管中的穿透液。
9. 在吸附柱中加入500 μL洗涤液，12,000 rpm离心1 min，弃穿透液。
10. 再将吸附柱12,000 rpm离心30 s以甩干乙醇。
11. 将吸附柱放入一个干净的1.5 mL离心管中。在吸附柱中央加入50 μL洗脱液（65-70℃预热），室温静置5 min。12,000 rpm离心2 min。将穿透液重新加入吸附柱中央，12,000 rpm离心1 min以洗脱更多基因组DNA。
12. 检测DNA质量。将所得的基因组DNA保存于-20ºC冰箱。
二. 对革氏阳性细菌样品（需用溶菌酶处理）。
1. 将 0.1-1.5 mL 过夜培养的革氏阳性细菌 12,000 rpm 室温离心 1 min后, 重悬于 0.6 mL 溶菌液中（溶菌液配制:30 mL 无菌水+600 mg 溶菌酶，配制后最好分装成小管并放-20℃长期保存，每次只用一小管)，颠倒混匀 5-10 次后放 37℃保温至少 30 min。(有的革氏阳性菌种可能需更长时间，需要自己根据不同的细菌摸索)。
2. 12,000 rpm 室温离心 10 min，小心弃上清。
3. 后续处理接上面的革氏阴性细菌提取步骤中的第 2 步。
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文献和实验♦ 适用范围：适用于快速提取植物组织细胞总RNA本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。♦ 储存事项：1. 所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。2. 不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。3. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。♦ 产品介绍：独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭
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