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文献和实验都可以保证无菌。如果试剂需要自己用干粉配制,那么在配制中需要严格按无菌操作进行。另外每次试剂配制量不宜过多,比如完全培养基建议以一到两周内用完为宜。试剂在分装时可以考虑再用针头式过滤器过滤一次,减少污染的可能性。如果所用移液器吸头是散装的,则注意在将吸头装入吸头盒时需要带手套,因为灭菌时无法完全去除吸头上可能粘附的油脂和其他杂质。 其次,安全柜每次使用前需要紫外照射30min灭菌,然后通风5min以上保证换气到位。每次处理细胞前应将实验需要的各种试剂、耗材备齐,尽量减少细胞处理过程中的来回
/管胰酶、抗生素可分装为1mL/管。分装最好先于细胞操作第五,操作之前,培养液先放到37度的细胞培养箱里复温。原因:尽量减少对细胞的刺激。低温对于细胞也是一个刺激因素。第六,操作之前,大脑先过一遍此次操作所需要用到的所有用具。将所有用具先放到无菌台面上。减少拿入拿出的动作,保证无菌。(如果万一发现少拿了什么,也不要紧,再加上就是。如果是枪头盒、移液管等用具,最好先用消毒酒精喷一下)。第七,操作之前,带着的手套先喷消毒酒精。然后再进入工作台。等一分钟,等手套上的酒精挥发之后再进行操作。6、 细胞
30 分钟。 4.灭菌塑料制品烘烤干燥,置洁净处备用。 (2)玻璃和金属物品 250 ℃ 烘烤 3 小时以上。 DEPC(二乙基焦碳酸酯) ODEPC 是 RNA 酶的化学修饰剂,它和RNA酶的活性基团组氨酸的咪唑环反应而抑制酶活性。 ODEPC 与氨水溶液混合会产生致癌物,因而使用时需小心。 1.试验所用试剂也可用 DEPC 处理,加入 DEPC 至 0.1% 浓度然后剧烈振荡 10 分钟再煮沸 15 分钟或高压灭菌以消除残存的DEPC,否则 DEPC 也能和腺嘌呤作用
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