抗-FLAG®M2亲和凝胶

哺乳动物细胞表达的难点和解决方案，都帮你整理好了

型的蛋白，或进行高解析度的结构分析，愈来愈多的实验组选择哺乳类表达系统来生产融合蛋白。其原因为哺乳动物细胞生产出的重组蛋白与人类蛋白十分相似，有较完整的蛋白折叠、组合及翻译后修饰[3]。因此，愈来愈多科学家们更加关注于—如何从哺乳类细胞中高效的纯化目标蛋白。1 亲和标签的选择首先，需考虑选择合适的亲和标签。常用于哺乳动物表达系统的亲和标签有 His-tag、FLAG-tag、GST-tag及 Strep-tag® 等[4-12]，整理于下表：（点击放大查看）这些亲和标签在使用上各有千秋。使用

蛋白表达系统

和有效的细胞裂解和蛋白提取。ANTI-FLAG® M2亲和力凝胶则是用于亲和纯化活化的FLAG融合蛋白。该试剂盒提供便利的实际、柱子和详细的FLAG融合蛋白亲和纯化操作说明。ANTI-FLAG M2能有效地结合FLAG融合蛋白，而不需要初级的步骤和校准。名称： Electron Transfer Dissociation (ETD)mass spectrometry fragmentation option公司：Thermo Electron CorporationETD通过转移电子到带正电荷的多肽

这些蛋白质互作实验方法，你都了解吗？

其他方法验证更详细的相互作用信息。 图 11：使用抗体进行 Co-IP 与使用 Strep-Tactin®XT 进行pull-down 融合蛋白沉降 pull-down IP 和 Co-IP 通过固定抗体来捕获诱饵蛋白质及其结合分子，而 pull-down 可使用带亲和标签的目的蛋白进行，在体外验证蛋白间的直接相互作用。Pull-down 是通过磁珠/琼脂糖填料固定带有标记的「诱饵」蛋白，从细胞裂解液、纯化蛋白或表达系统中捕获「猎物」蛋白，然后将复合物蛋白分离后进行凝胶或质谱分析，从而确认互作