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上海泽叶生物科技有限公司
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18
- 英文名:
LAMP引物
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1年
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-20
- 规格:
4 OD×6
LAMP引物
| 环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),依赖于识别保守序列DNA的6个特异性片段的4条引物(2条外引物和2条内引物)和一种链置换DNA聚合酶(Bst DNA polymerase)。反应体系一般包括4条引物、Bst DNA聚合酶缓冲液、具有链置换特性的Bst DNA聚合酶、dNTP、模板DNA、甜菜碱、Mg2SO4等。LAMP检测体系中基因的扩增和产物的检测可一步完成,扩增效率高,可在30~60min扩增109~1010倍,特异性较高。2002年Nagamine通过增加LoopF和LoopB两条引物,使得等温扩增的速度显著加快(可在10~15min内完成检测),并大大提高了检测效率(高出7个数量级)。 因此,目前LAMP扩增实验中以6条引物组合为主,分别是F3、B3、FIP(F1c+F2)、BIP(B1c+B2)、LoopF、LoopB,灵敏度要求不高的仍然可采用无LoopF/B的四引物组合。 |
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制品内容 |
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| 使用专业的LAMP Designer引物设计引物设计如下六条引物。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 注意:LAMP技术存在一定比例的非特异性扩增,因此不能保证每组引物100%的理想扩增,有时需要多套进行筛选。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
储存 |
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| 引物干粉于室温保存3个月,稀释后引物-20℃可保存1年。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
10XLAMP引物工作液的配制 |
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文献和实验LAMP引物设计的在线网站(http://primerexplorer.jp/e/),只要导入靶基因就能自动生成成组引物。 以某一微生物的鞭毛基因为例讲解一下LAMP相物设计的过程: 首先单击浏览钮择靶基因序列文件,靶序列默认的是小于2 2 kbp。支持三个类型的文件,普通文本格式(仅含序列), FASTA格式和GenBank 格式文件。 第二,从下面个项中择定参数设定(引物设计条件条件。基于GC含量的自动判断, 起始的参数是特定的:如果GC含量小于或等于45%.,则选取AT丰度高的区
1.LAMP引物的设计LAMP引物的设计主要是针对靶基因的六个不同的区域,基于靶基因3' 端的F3c、F2c和Flc区以及5' 端的Bl、B2和B3区等6个不同的位点设计4种引物。FIP(Forward Inner Primer):上游内部引物,由F2区和F1C区域组成,F2区与靶基因3’端的F2c区域互补,F1C区与靶基因5' 端的Flc区域序列相同。F3引物:上游外部引物(Forward Outer Primer),由F3区组成,并与靶基因的F3c区域互补。BIP引物:下游内部引物
aaaaaaaaaa aaaaaaaaa 用primer5.0设计了两队引物,不知道哪一个好?评分都是100 引物1:5-GATGGCAAGGGGAAGAGT-3 3-CGAGATACGGCAGAAGAGG-5
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