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拟南芥营养液(干粉+浓缩液)

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  • ¥498 - 1398
  • 信裕生物
  • XY1060S
  • 中国
  • 2025年07月15日
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    • 英文名

      Arabidopsis thaliana nutrient salt mixture solution

    • 保质期

      一年

    • 供应商

      上海信裕生物科技有限公司

    • 保存条件

      RT

    拟南芥营养液(干粉+浓缩液)

    中文名:拟南芥营养液(干粉+浓缩液)

    英文名:Arabidopsis thaliana nutrient salt mixture solution

    CAS:N/A

    级别:N/A

    分子量:N/A

    分子式:N/A

    纯度:N/A

    储存条件:RT,密封保存

    产品简介

        信裕生物出品的拟南芥营养液(干粉+浓缩液)(NSP1060),也有实验室称为PNS营养液,分为干粉和浓缩液两个部分,称取0.36g干粉溶解于1L蒸馏水中,完全溶解后再加入1mL钙浓缩液,混匀即为pH值5.7的营养液,无需调整pH值。该产品易储存运输,配置方便快捷。

    英文名称:Arabidopsis thaliana nutrient salt mixture

    产品性状:白色至淡黄色粉末

    工作浓度:水溶解,干粉359.295mg/L,加1ml/L 1000×钙浓缩液。

    运输条件:常温运输

    储存条件:2-8℃,密封储存

    特别说明:该产品不适宜制备高浓度母液,会有沉淀产生。

    产品组成:(mg/L)

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    使用方法:

    1.根据用量,称取干粉混合物加入相应体积的蒸馏水内,完全溶解后加入适量钙浓缩液,混匀。

    2.本品配制完成后pH为5.7±0.2,无需调整。如有特殊要求,可根据要求调整pH值。

    3.施入配制好的营养液。

    注意事项:

    1.大量元素低温储存可能会有析出情况,恢复常温完全溶解即可使用。

    2.三种母液不要同时加入,避免产生沉淀。

    拟南芥培养方法:

        拟南芥生长的适宜温度白天为22℃-24℃,夜温20-22℃,适宜的湿度为60-70%,生长期适宜的光强为150μmol• S-1• M-2(6支36 W日光灯下35cm处测得)。幼苗期不耐高光强,可适当遮荫。光质也较重要,应选用植物生长专用的日光灯。拟南芥属于长日照植物,在日照长于12小时下才会开花,一般拟南芥生长室的日照长度定于14-16h为佳。

    1.准备育苗培养基:2.29 g/L 1/2 MS(PM1061),Sucrose(CS10581):10 g/L,pH5.7,Agar(CA1331):0.7-0.8 %.121℃灭菌15分钟,60℃左右在超净台内分装入直径100mm培养皿(25 mL)。

    2.种子消毒:种子放在1.5mL离心管中,加入1 mL的种子消毒液(2% NaClO(市售10%溶液)和0.1% Triton-X100),消毒10 min(移液器反复吸吹),用无菌水洗5次以上(移液器反复吸吹)。

    3.点种:种子里可多加些水,用移液器吸取种子,均匀铺到培养皿上,可根据需要选择种植的密度(一般不超过30株,不要太密,否则根缠在一起不好移苗),用移液器吸除培养基表面上的水,并置于超净台内吹干培养皿表面上的水,密封盖子,4℃暗处理两天后(春化),移到光照培养箱(22 ℃,光周期12 h),两周后再移苗。若种子较密,光照培养箱中生长1周则要移苗,且需适当遮荫。

    4.移苗:将蛭石与珍珠岩按3:1的比例混好作为基质,装入营养钵,将营养钵放入不透水的平底塑料育苗盘,在育苗盘中加水至3 cm高,水就会通过营养钵的底孔渗入,待基质湿透即可移苗。用镊子轻轻从培养皿中连根拉出小苗,把根平放在蛭石表面,用镊子把根轻轻压入基质内,移苗后用保鲜膜覆盖营养钵3-4天。从苗期直至开花,每隔2-3天浇一次水,始终保持育苗盘内有1-3 cm的水层,整个生长期浇3-4次拟南芥营养液(NSP1060)。在收种期,不要浇水,保持育苗盘干燥。

    5.收种:在种荚变黄,变干时收种。将种子抖落容器内,收集后用筛网除去杂质,将种子装入小纸袋中,标记好,置于干燥的环境中待种子进一步干燥后,封存于1.5mL离心管。

    拟南芥的转化方法:

        渗透培养基配制:2.29g/L 1/2MS(大量元素减半);5% 蔗糖;0.5% MES;用KOH调至pH5.7;再加:10 μl/L的6-BA母液(1 mg/mL,乙醇溶解);200 μl/L Silwet L-77(在蔗糖溶解后加入,否则蔗糖很难溶解)。经转化的拟南芥,种子收获后需在相应的抗性平板上筛选转化子。

    1、制备好已转化了相应质粒的农杆菌菌液10 mL,转入200 mL大瓶过夜培养,农杆菌液OD600在1.2-1.6即可。

    2、室温5000 rpm离心15分钟。

    3、弃上清,将农杆菌沉淀悬浮于相应体积的渗透培养基里,OD600在0.8左右为宜。

    4、直接将拟南芥的花浸入农杆菌悬浮液,持续几秒钟,取出再浸入,反复3-5次。浸染后的植株平放在带有盖子的育苗盘中,或者用保鲜膜盖好,以保持湿度。移入恒温室避光培养24小时,第二天揭膜,正常光照培养。

    转化子的筛选:

    1、种子消毒:用种子消毒液(2% NaClO和0.1% Triton-X100)处理10分钟(移液器反复吸吹);然后用无菌水洗5次(移液器反复吸吹)。

    注意:消毒时间不宜过长,否则影响种子发芽。

    2、处理后的种子用移液器均匀涂布在固体筛选培养基表面。不宜过密,切忌将种子堆叠在一起。如种子特别容易污染,可在固体筛选培养基中加入工作浓度为250 μg/mL的头孢霉素(SL4090)抑制农杆菌的生长。

    3、4℃避光春化2到3天,移入22℃恒温箱培养。

    4、观察种子在固体筛选培养基上生长情况, 相比于其他萌发的幼苗,具有长根的幼苗可确定为转化子时,将转化子移栽至浇透拟南芥营养液(NSP1060)的人工基质上培养。

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