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酵母蛋白提取试剂盒
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Yeast Total Protein Extraction Kit
一年
上海信裕生物科技有限公司
RT
中文名:酵母蛋白提取试剂盒
英文名:Yeast Total Protein Extraction Kit
CAS:N/A
级别:N/A
分子量:N/A
分子式:N/A
纯度:N/A
储存条件:2-8℃
储存条件:RT,未开封有效期24个月。
产品内容:
产品介绍:
本产品通过使用玻璃珠震荡法,结合化学裂解法破碎酵母细胞壁,适用于多种酵母菌的培养物(包括菌液或平板菌落)。提取的酵母总蛋白可用于SDS-PAGE凝胶电泳及免疫印迹(Western Blot)实验。本产品提取蛋白为变性蛋白,不能用于蛋白活性检测等相关实验。
准备步骤:
将提取液成分II全部加到提取液成分I中,充分混匀作为提取液备用,未用部分-20 ℃冻存。
操作步骤:
1. 5,000 rmp,4 ℃离心5 min收集酵母菌液细胞沉淀(酵母菌液OD值0.5-2.0)。
2. 加入1 mL洗涤液震荡混匀,5,000 rmp,4 ℃离心5 min沉淀酵母细胞,弃上清。
3. 用100 μL提取液悬浮酵母细胞,并快速转移到1.5 mL离心管中,95-100 ℃金属浴或水浴3 min。
4. 加入0.2 g玻璃珠,旋涡震荡器上剧烈震荡5-10 min。
5. 用移液器或者巴斯德吸管回收提取液。
6. 剩余玻璃珠的离心管中再次加入100 μL提取液,稍加震荡,再次回收提取液。
7. 合并两次提取液即为酵母总蛋白样品。
8. (可选步骤)12,000 rmp,4 ℃离心15 min,上清含可溶性蛋白质,沉淀含不溶性蛋白质。
9. 总蛋白样品于95-100 ℃金属浴或水浴1 min,可直接用于SDS-PAGE电泳(无需添加Loading buffer)。
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