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酵母质粒快速提取缓冲液
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一年
上海信裕生物科技有限公司
20°
中文名:酵母质粒快速提取缓冲液
英文名:酵母质粒快速提取缓冲液
CAS:N/A
级别:N/A
分子量:N/A
分子式:N/A
纯度:N/A
储存条件:-20°保存
产品说明:
使用本缓冲液快速提取的质粒仅适用于PCR扩增鉴定酵母阳性克隆或获得的PCR产物用于测序分析。
使用方法:
操作说明:
1、吸取20 μL的酵母质粒快速提取缓冲液放入1.5 mL的离心管中。
2、用无菌枪头挑取长度1~2 mm的酵母菌悬浮在装有缓冲液的离心管中。
3、在95 °C的水浴锅或者金属浴中煮沸5-10 min。
4、冰上放置2 min,常温条件下12,000 rpm,离心5 min,吸取上清移至新的离心管。
5、得到的质粒可用于PCR分析。建议每20 μL体系加入质粒模板2 μL,PCR循环数40个。可以增大体系,优于模板未经纯化,建议加入模板量体积不超过反应总体积的1/10。
注意事项:
1.建议酵母克隆先在平板上划1 cm左右的短线,生长2-3天后,挑取1~2 mm的酵母菌用做质粒提取。
2.可根据酵母菌的多少适当增加或减少缓冲液的使用量。
3.如PCR结果不是很理想,建议将质粒梯度稀释作模板。在水浴之后放-80℃或-20℃冷冻后重复水浴一次,再离心取上清也会提高PCR产率。
4.未使用的酵母质粒建议放在4 ℃冰箱保存。
5.建议和我公司的PCR mix一同使用,效果更好。
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