- ￥400
- 联迈生物
- LM-29728S
- 上海
- 2025年07月15日
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18
- 英文名：
Shrimp Alkaline Phosphatase
- 保质期：
2年
- 供应商：
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
500U
- 英文名：
- Shrimp Alkaline Phosphatase
- 别名：
- SAP
- 介绍：
虾碱性磷酸酶（Shrimp Alkaline Phosphatase,SAP)催化DNA和RNA 的5’和3’磷酸单脂的去磷酸化反应，也可水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸（NTP 和 dNTP）。该酶在分子生物学研究中应用广泛，如去除DNA和RNA 末端的磷酸基团，用于后续的克隆和探针末端标记。在克隆中，载体经虾碱性磷酸酶去磷酸化后因5’ 端无磷酸基团，因而不可以和自身3’ 端连接。虾碱性磷酸酶可作用于5’突出端、凹陷端和平末端，也可用来降解PCR反应中的游离dNTP，用于制备测序模板和SNP分析。该虾碱性磷酸酶在65℃温育5分钟即可完全的、不可逆的失活，因此，在连接或末端标记之后，可以不用去除。基于以上特性，该酶是传统去磷酸化酶--小牛肠碱性磷酸酶的替代物。 组分
组分名称 500U Shrimp Alkaline Phosphatase (5 U/μl) 100 μl 10×SAP Buffer 1 ml 应用
- DNA 和 RNA 的去磷酸化
- 防止克隆载体的自连
- 制备5´末端标记模板
- 去除 PCR 产物中的 dNTP 和焦磷酸盐
活性定义
1单位指在25℃条件下，30分钟能使1μg经 HindIII（产生5’突出末端）消化的 pUC19 DNA 去磷酸化所需的酶量。去磷酸化标准是指在自连接反应中能抑制＞95%的DNA 再连接。 储存
-20℃可保存3年。 使用注意事项
（1）1×SAP Buffer：50 mM Bis-Tris HCl pH 6.0，1mM MgCl2，0.1 mM ZnCl2，25℃ 温育。
（2）热失活：65℃ 加热 5 分钟，不可逆失活。该酶通常用于酶切载体的去磷酸化，因其不可逆热失活特性。当完成去磷酸化反应后，无需再纯化产物，可以直接用于后续连接反应。
（3）虾碱性磷酸酶也可以用来降解PCR反应中的游离dNTP，用于制备测序模板和 SNP 分析。同样无需纯化，可直接用于下游实验。 - 储存条件： -20℃
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文献和实验分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液 50ul ，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取 50 μ l分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液 50 μ l，混匀后从第七、第八孔中分别取 50 μ l加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液 50 μ l，混匀后从第九第十孔中各取 50 μ l弃掉。（稀释后各孔加样量都为 50 μ l，浓度分别为 60 U/L ，40 U/L ，20 U/L ，10 U/L ， 5 U/L
加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液 50μl ，混匀后从第九第十孔中各取 50μl 弃掉。（稀释后各孔加样量都为 50μl ，浓度分别为 90U /L ， 60U /L ， 30U /L ， 15U /L ， 7.5U /L ）。 2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、 待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40 μ l ，然后再加待测样品 10 μ l （样品最终稀释度为 5 倍）。 加样
每分钟平均吸光度变化（AA/分）。计算：ChE（U/L）=AA/分×65800(37℃)。②碱性磷酸酶（ALP）速率法测定，其方法如下：波长405nm，温度37℃，工作液1000μl，样品20μl，混合均匀，读取连续吸光度，确定每分钟平均吸光度变化（AA/分）。 计算：ALP（U/L）=AA/分×3433(37℃) 仪器：采用雅培Abbott型全自动生化分析仪。 试剂：上海生物科华股份有限公司提供。 结 果 各种肝病及骨骼疾病ChE和ALP活力
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