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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- CAS号:
APC03
- 保存条件:
Caspase 3活性检测试剂盒
- 库存:
Caspase 3活性检测试剂盒
- 供应商:
上海研卉生物科技有限公司
- 英文名:
Caspase 3活性检测试剂盒
- 规格:
100次分析
货号;APC03
描述
1.产品简介
Caspase是近年来发现的一组存在于胞质溶胶中的结构上相关的半胱氨酸蛋白酶,它们的一个重要共同点是活性位点都含有半胱氨酸,并特异地断开天冬氨酸残基后的肽键。Caspase一词是从Cysteine aspartic acid specific protease 的缩写衍生而来,就反映了这个特征,而这种高度的特异性,在蛋白酶中是很少见的。细胞中合成的caspase以无活性的酶原状态存在,经活化方能执行其功能。Caspase 3是细胞凋亡过程中最主要的终末剪切酶,也是CTL细胞杀伤机制的重要组成部分。Caspase 3可以剪切procaspase 2、6、7和9,并可以直接特异性剪切许多caspase底物,包括PARP (poly(ADP-ribose) polymerase)、ICAD (Inhibitor of caspase-activated deoxyribonuclease)、gelsolin和fodrin等。本产品基于Caspase 3催化底物Ac-DEVD-pNA产生黄色的pNA (p-nitroaniline),测定pNA在405 nm吸光度的原理,检测Caspase 3的活性。试剂盒提供的pNA可作为定量Caspase 3活性的标准品。当使用酶标仪检测或容量不超过100 μl的分光光度检测杯检测时,除标准曲线外可以检测20个样品(20T)或100个样品(100T)。
2.产品特点
•即用型,无需购买其他产品;
•灵敏度高,特异性强,结果稳定;
•价格便宜,现货供应。
3.试剂盒组分
| 目录号/规格 | APC03-20 | APC03-100 |
| 20 T | 100 T | |
| 细胞裂解液 | 5 ml | 25 ml |
| 检测缓冲液 | 5 ml | 25 ml |
| 底物Ac-DEVD-pNA (2mM) | 200 μl | 200 μl × 5 |
| pNA (10mM) | 200 μl | 1 ml |
4.结果示例
1)pNA标准曲线
| μM | A405 | Average | Corrected | |
| 200 | 0.544 | 0.538 | 0.541 | 0.500 |
| 100 | 0.295 | 0.292 | 0.294 | 0.252 |
| 50 | 0.173 | 0.172 | 0.173 | 0.131 |
| 20 | 0.094 | 0.093 | 0.094 | 0.052 |
| 10 | 0.068 | 0.068 | 0.068 | 0.027 |
| 0 | 0.041 | 0.042 | 0.042 | 0.000 |

2)HL60细胞经10 μM喜树碱诱导4 h,检测Caspase 3酶活性变化
| A405 | Average | Corrected | |||
| 空白对照组 | 0.046 | 0.045 | 0.043 | 0.045 | 0.000 |
| 实验对照组 | 0.124 | 0.129 | 0.132 | 0.128 | 0.083 |
| 实验组 | 0.390 | 0.386 | 0.394 | 0.390 | 0.345 |
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文献和实验Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中caspase-3为关键的执行分子,它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个大亚基(17KD)和两个小亚基(12KD)组成,裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞,caspase-3的活性明显下降。1、Western blot 分析Procaspase-3的活化,以及活化
Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中caspase-3为关键的执行分子,它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个大亚基(17KD)和两个小亚基(12KD)组成,裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞,caspase-3的活性明显下降。1 Western blot 分析Procaspase-3的活化,以及活化
一、检测原理 Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中,没有活性;在细胞发生凋亡阶段,Caspase被激活,活化的Caspase可裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。 Caspase分光光度法检测试剂盒的原理是将Caspase序列特异性的多肽偶联至黄色发光基团pNA (p-nitroaniline)。当该底物被活化的Caspase剪切后,黄色
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