Caspase 3活性检测试剂盒

Caspase 3活性检测试剂盒
货号;APC03

描述

1.产品简介
Caspase是近年来发现的一组存在于胞质溶胶中的结构上相关的半胱氨酸蛋白酶，它们的一个重要共同点是活性位点都含有半胱氨酸，并特异地断开天冬氨酸残基后的肽键。Caspase一词是从Cysteine aspartic acid specific protease 的缩写衍生而来，就反映了这个特征，而这种高度的特异性，在蛋白酶中是很少见的。细胞中合成的caspase以无活性的酶原状态存在，经活化方能执行其功能。Caspase 3是细胞凋亡过程中最主要的终末剪切酶，也是CTL细胞杀伤机制的重要组成部分。Caspase 3可以剪切procaspase 2、6、7和9，并可以直接特异性剪切许多caspase底物，包括PARP (poly(ADP-ribose) polymerase)、ICAD (Inhibitor of caspase-activated deoxyribonuclease)、gelsolin和fodrin等。本产品基于Caspase 3催化底物Ac-DEVD-pNA产生黄色的pNA (p-nitroaniline)，测定pNA在405 nm吸光度的原理，检测Caspase 3的活性。试剂盒提供的pNA可作为定量Caspase 3活性的标准品。当使用酶标仪检测或容量不超过100 μl的分光光度检测杯检测时，除标准曲线外可以检测20个样品(20T)或100个样品(100T)。
2.产品特点
•即用型，无需购买其他产品；
•灵敏度高，特异性强，结果稳定；
•价格便宜，现货供应。
3.试剂盒组分

目录号/规格	APC03-20	APC03-100
	20 T	100 T
细胞裂解液	5 ml	25 ml
检测缓冲液	5 ml	25 ml
底物Ac-DEVD-pNA (2mM)	200 μl	200 μl × 5
pNA (10mM)	200 μl	1 ml

4.结果示例
1）pNA标准曲线

μM	A405		Average	Corrected
200	0.544	0.538	0.541	0.500
100	0.295	0.292	0.294	0.252
50	0.173	0.172	0.173	0.131
20	0.094	0.093	0.094	0.052
10	0.068	0.068	0.068	0.027
0	0.041	0.042	0.042	0.000

2）HL60细胞经10 μM喜树碱诱导4 h，检测Caspase 3酶活性变化

	A405			Average	Corrected
空白对照组	0.046	0.045	0.043	0.045	0.000
实验对照组	0.124	0.129	0.132	0.128	0.083
实验组	0.390	0.386	0.394	0.390	0.345