- ￥2500
- IMMOCELL
- 厦门
- IM-H205
- 2026年04月09日
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Human Venous Endothelial Cells
- 库存：
9999
- 供应商：
IMMOCELL
- 肿瘤类型：
详询
- 细胞类型：
详询
- 品系：
人源细胞株
- 组织来源：
脐静脉/血管内皮
- 相关疾病：
详询
- 物种来源：
人
- 免疫类型：
详询
- 细胞形态：
上皮细胞样，贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 器官来源：
脐静脉/血管内皮
- 运输方式：
顺丰快递
- 年限：
永久
- 生长状态：
正常
- 规格：
1×106cells/T25或1mL冻存管
HUVEC 人脐静脉内皮细胞(免疫荧光鉴定)
一、细胞介绍
HUVEC细胞来源于人静脉内皮，可在半固体培养基中形成克隆，在免疫抑制小鼠中不能形成肿瘤。
二、细胞特性
1) 来源：人脐静脉/血管内皮
2) 形态：上皮细胞样，贴壁生长
3) 含量：>1x106
4) 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5) 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
6) 培养基：ECM专用培养基
7) 培养条件：气相：95%空气+5%二氧化碳;温度：37℃
三、细胞免疫荧光鉴定
四、细胞接收后的处理
1) 收到细胞后，请检查发货培养瓶的状况，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2) 在显微镜下确认细胞生长状态时，最好在低倍镜(4或5X物镜)下进行，能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下，同时给刚收到的细胞拍照，(10×，20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。
3) 观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约4-6h。
4)备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议1：2传代 。
五、细胞培养步骤
1.培养基及培养冻存条件准备
1) 准备ECM培养基
2) 培养条件： 气相：空气，95%;二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液：无血清冻存液或90%血清，10%DMSO，现用现配。
2.huvec细胞复苏步骤
a.将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。
b.在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。
c.然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL培养基，培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
3.huvec细胞传代步骤
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
a.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b.加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，弃去消化液，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，加少量培养基终止消化。
c.按6-8 mL/瓶补加培养基，轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心4 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。
d.将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。
4.huvec细胞冻存步骤
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例
a.收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b.根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c.将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
六、huvec细胞图片
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- 内容
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文献和实验人脐静脉内皮细胞（ HUVEC ）培养 1 ). 将15-20cm长的新生儿脐带放入无菌的PBS溶液中储存。 （注：4℃下最多贮存24小时，室温下不超过6小时，否则废弃） 2 ). 用一个钝头的针头扎入脐带静脉管中，用无菌的PBS溶液冲洗3-5次，将污血冲洗干净为止。 3 ). 用手术钳夹紧脐带下端，加入15ml 的胶原酶（1mg/ml）室温下消化15-20分钟，并不时上下摇动脐带。 4 ). 消化完后，将下端手术钳松开
的二抗50μl(异硫氰酸标记羊抗鼠IgG，北京)，放入37℃2h后，用PBS洗涤3次。然后立即在荧光显微镜下观察，摄片。 血管内皮细胞鉴定结果： VWF相关抗原间接免疫荧光检查，原代及传代培养的内皮细胞浆中有黄绿色的荧光着色，胞核呈黑绿色，整个细胞轮廓清楚。作为对照的内皮细胞片子中，偶见绿色斑点散发荧光，未见细胞轮廓。 5．内皮细胞体外生长情况 用胰蛋白酶消化的人脐静脉内皮细胞，接种在24孔塑料培养板各孔内4h后，大部分细胞贴壁。早期细胞呈小多角、球形、呈团状，少数细胞伸展，48～72h
皱缩、彼此分离或呈大片状分离即可终止消化。加入含有10%小牛血清的培养液，吸管吹打，制成细胞悬液，计数后按105个细胞/ml，继续培养。 4．血管内皮细胞的鉴定 1） 倒置显微镜 观察细胞的形态特点。2）VWF相关抗原免疫荧光检查：在24孔塑料培养板孔内放置无菌的盖玻片0.5cm×0.6cm，每孔中种植1ml含有105个细胞的原代或传代内皮细胞悬液。待内皮细胞生长至近融合状态时，取出盖玻片，用PBS冲洗3次，投入冷丙酮中(-18～-20℃)，细胞面向上，作用7min
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