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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温冷藏
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
RT-LAMP kit for western equine encephalomyelitis virus
- 库存:
100
- 供应商:
上海研生
- 规格:
50次
2-ΔΔCt
前提:目标序列和内参序列的扩增效率接近100%且偏差在5%以内
1、用内参基因的CT值归一目标基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2、用校准样本的ΔCT值归一试验样本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3、计算表达水平比率:
2 –ΔΔCT=表达量的比值
Rhesus antibody Rh RNF144 E3泛素蛋白连接酶144A抗体 规格 0.2ml
Rhesus antibody Rh RNF14 环指蛋白14抗体 规格 0.2ml
Rhesus antibody Rh RNF14 环指蛋白14抗体 规格 0.2ml
Rhesus antibody Rh RNF139 环指蛋白139抗体 规格 0.2ml
Rhesus antibody Rh RNF138 环指蛋白138抗体 规格 0.2ml
Rhesus antibody Rh RNF133 环指蛋白133抗体 规格 0.2ml
Rhesus antibody Rh RNF130/ 环指蛋白130抗体 规格 0.2ml
Rhesus antibody Rh RNF13 环指蛋白13抗体 规格 0.2ml
Rhesus antibody Rh RNF128 环指蛋白128抗体 规格 0.2ml
Rhesus antibody Rh RNF126 环指蛋白126抗体 规格 0.2ml
Rhesus antibody Rh RNF123 环指蛋白123抗体 规格 0.2ml
Rhesus antibody Rh RNF122 环指蛋白122抗体 规格 0.2ml
Rhesus antibody Rh RNF121 环指蛋白121抗体 规格 0.2ml
Rhesus antibody Rh RNF12 环指蛋白12抗体 规格 0.2ml
Rhesus antibody Rh RNF113B 环指蛋白113B抗体 规格 0.2ml
Rhesus antibody Rh RNF113A 环指蛋白113A抗体 规格 0.2ml
Rhesus antibody Rh RNF111 环指蛋白111抗体 规格 0.2ml
Rhesus antibody Rh RNF11 环指蛋白11抗体 规格 0.2ml
Rhesus antibody Rh RNF10 环指蛋白10抗体 规格 0.2ml
Rhesus antibody Rh RND3/RHOE Rho家族GTP酶3抗体 规格 0.1ml
Rhesus antibody Rh RNASE4/Angiogenin 血管生成素核糖核酸酶4抗体(肌萎缩性侧索硬化症蛋白) 规格 0.1ml
具有下列特点:
1.根据 指标的保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
2.灵敏度比常规 PCR 高 2-3 个数量级,可以达到几百拷贝/反应。
西部马脑脊髓炎病毒RT-LAMP试剂盒3.即开即用,用户只需要提供样品模板,操作简单,定量准确快速。
4.一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。
5.本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6.本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括绝对定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的绝对定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
使用方法:
一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例) 1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
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文献和实验吗?当然,专用的更专业: TRIpure LS Reagent 液体样本RNA提取试剂:适用全血、血清、血浆中总RNA和病毒RNA的提取。原价:680元/100ml,体验价:544元/100ml 血液(液体样本)总RNA快速提取试剂盒(离心柱型):适用全血、血清、血浆中总RNA和病毒RNA的提取。原价:780元/50次,体验价:624元/50次 多糖多酚植物总RNA快速提取试剂盒(离心柱型):适用仙人掌、仙人球、芦荟、凤梨
1、肿瘤细胞培养问题:问:我养的肿瘤细胞,传多少代以后不能用、需要重新复苏新的呢?我总觉得细胞形态不好,但长的还挺快!答:初代培养的细胞在培养条件较好情况下,细胞增殖旺盛,并能维持二倍体核型,为保持二倍体细胞性质,细胞应在初代培养期或传代后早期冻存。如不冻存,则需反复传代以维持细胞的适宜密度,以利于生存。但这样就有可能导致细胞失掉二倍体性质或发生转化。一般情况下当传代10-50次左右,细胞增殖逐渐缓慢,以至完全停止。组织和细胞在培养中生命期如何,这要看细胞的种类、性状和原供体的年龄等情况
,使操作简便,污染减少。本方法对于原样品量极微且需病史追踪保存的(如子宫颈涂片或涂片)具有实用价值。 十、反转录PCR方法检测RNA RNA的多聚酶链式反应(RT-PCR)是以RNA为模板,联合逆转录反应(reverse transcrip-tion, RT)与PCR,可用于检测单个细胞或少数细胞中少于10个拷贝的特异DNA,为RNA病毒检测提供了方便;并为获得与扩增特定的RNA互补的cDNA提供了一条极为有利和有效的途径。 RNA扩增包括两个步骤:①在单引物的介导下和逆转
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