FOR Muscarinic acetylcholine r

FOR Muscarinic acetylcholine receptor M3 ELISA Kit取样要求酶标条可以随意拆卸，根据需求可多次用，用剩下的妥善安排保存，尽量在一个月内用掉。在我们实验前要把elisa试剂盒在正常室内温度放置15-30分钟之后再进行实验，一个试剂盒不管您分几次测都要做标准曲线，尽量做复孔，可以很好的避免假阳性。另外需要特别说明一下：不同批次取样要求是不可以混着用的。
外观：液体盒装
规格：96T/48T
原理：应用双抗体夹心法测定标本中人α1酸性糖蛋白试剂盒，α1-AGP取样要求定量水平。 主要成分:酶标包被板，抗体，标准品等等。 检测样本：血清，血浆，组织匀浆，细胞培养上清，细胞裂解液，腹腔液，尿液，脑髓液，唾液，粪便本等样本，用于：实验室研究使用。
运输：现货供应组

成及试剂配制：
1. 酶联板（Assay plate ）：一块（96孔）。
  2. 标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3. 样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4. 生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. 生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
  9. 浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
  10. 终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

操作步骤：
1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。
2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先加入待测样本10μL，再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍)；空白对照孔不加。
4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。
6、加酶标工作液：每孔加入酶标工作液50μL，空白对照孔不加。
7、温育：重复4的操作。
8、洗板：重复5的操作。
9、显色：每孔先加入显色剂A 液50μL，再加入显色剂B液 50μL，37℃避光显色15min。
10、终止：取出酶标板，每孔加终止液50μL，终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。
11、测定：以空白孔调零，在终止后15分钟内，用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。
12、计算：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。