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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
18
- 英文名:
T7 RNA Polymerase
- CAS号:
9014-24-8
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件:
-20℃,避免反复冻融
- 规格:
1000u
- 英文名:
- T7 RNA Polymerase
- 别名:
- CAS号:
- 9014-24-8
- MDL:
- MFCD00132197
- 介绍:
单位定义
在标准反应体系下,37℃ 1 小时内将 1 nmol 的 ATP 掺入酸不溶物所需要的酶量定义为一个活性单位。 应用
- 制备放射标记的 RNA 探针
- 合成用于体外翻译的 RNA
- 合成用于结构、加工和催化性能研究的 RNA
- 合成 RNA 反义链,调控基因表达
1X T7 Transcription Buffer
40 mM Tris (pH 7.8), 20 mM NaCl, 6 mM MgCl2, 2 mM Spermidine HCl, 10 mM DTT 酶储存液
10 mM Tris-HCl, 0.1 M NaCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 50% Glycerol, 0.01% (w/v) Triton X-100 , pH 7.5。 储存
-20°C可保存2年,避免反复冻融。 热失活
70°C,10min。 注意事项
1.质粒DNA的质量影响RNA的量和完整性。质粒DNA的浓度越高,生成RNA的质量越高。质粒模板DNA应该无RNase、蛋白、盐、EDTA、RNA污染, A260/280 值在1.8-2.0。
2.该酶对高浓度NaCl或KCl不耐受,当其浓度高于 150mM时,其活性受到显著抑制(~50%)。 - 储存条件: -20℃,避免反复冻融
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文献和实验mRNA Amplification with T7 RNA Polymerase
Materials MessageAmp II aRNA Amplication Kit (Cat #1751, Ambion) 100% Ethanol RNA samples (e.g. 1 µg RNA per sample) Procedure Reverse transcription Verify that EtOH (24 mL) has been added to the Wash Buffer. Turn
的 ULTRAhyb-Oligo 缓冲液(17x 缓冲液)。使用前需在 68℃ 环境中进行溶解。 ( 7 ) 用 0.5 U T4 多核苷酸激酶(PNK,Roche) 和 6 μl [γ-32P ] ATP ( 5000 Ci/mmol ) 标记 1 μmol/L DNA 寡核苷酸(约含有 10 个与目的基因互补的 DNA 寡核苷酸)。 ( 8 ) 参照 Hamilton 和 Baulcombe 的方法,在 35°C 条件下进行 RNA 印迹杂交[14]。 3. 注释 注
RNA in situ protocol for DNA and RNA probes
are carried out at 55oC. 15) Add17 ng (17 ul) of heat-denatured probe to each tube containing 20-50 ul of embryos and 100 ul of hybridization buffer. Hybridize at 48oC (55oC for riboprobes) for 24-48 hrs. 16) Wash the embryos 4-5x in 1 ml of 48oC
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









