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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
18
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件:
RT,12个月
- 规格:
100ml
- 英文名:
- 别名:
- 介绍: 又称培养细胞消化液,用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化。
- 注意事项:无菌溶液,不含胰蛋白酶,对细胞损伤较小。
- 储存条件: RT,12个月
- 用途: 本品仅供科研,不得用于其它用途。
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文献和实验胰酶使用注意:1、在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。2、胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。贴壁细胞的消化:1、吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清2、加入少量胰酶细胞消化液,略盖过细胞即可,根据胰酶效率差异可以增加惑减少胰酶用量。室温放置30秒至2分钟(不同的细胞消化时间有所不同)3、显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化呈白茫状;或者用枪吹打
易造成细胞膜损伤而出现细胞坏死的假阳性,甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-荧光素的结合从而干扰对于细胞凋亡的检测。同时,胰酶细胞消化液中应尽量不含EDTA,因为EDTA可能会影响Annexin V与磷脂酰丝氨酸的结合。 加入步骤1中收集的细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻悬浮细胞并计数。 注意:加入细胞培养液非常重要,一方面可以收集已经悬浮的发生凋亡或坏死的细胞,另一方面细胞培养液中的血清
温和,对细胞损伤较小,但是,价格也较贵。中止同样是用血清。 二、离子螯合剂:不破坏细胞表面分子 ,仅与CAMs螯合,因此,如果检测细胞表面分子的话,尽量,甚至是一定不要用酶消化法。 1、EDTA 。用得也是非常多。一般浓度在0.02%左右。作用于细胞与间质,对细胞间也有一定作用。注意,它能显著影响pH值,而且在弱碱性条件下才易溶。因此,配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此,消化下来的细胞要洗一遍。 2、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤
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