10ul盒装滤芯吸头100ul,200ul,1000ul移液

大神教你瞬时转染快，准，狠！

板液体每孔在 2ml 左右，不宜太多，或者太少。取两个 1.5mlEP 管，记为 A 管，B 管，每个 EP 管加入 250ul Opti-MEM I，然后 A 管加入 5-10ul lipofectamine 2000，B 管加入 100pM-200pM 的 siRNA（见买来的 siRNA 说明书），然后静置 5min，混合在一起，静置 20min，用 AB 混合液加入到 1.5ml 的无血清培养基 C 内，混匀； 将六孔板里的细胞的液体吸出，用 PBS 清洗两遍； 将 ABC 混合液 2ml

做 ChIP 的心得体会

time PCR 之前都要把 sample 离心保证取样的准确。 11、1~10ul 的*取 3ul 以上才比较准确，所以考虑好自己 PCR 反应体系的配置。 12、一个 ChIP 一般需要 3~4 天的时间，其中有几个步骤是可以停下来的： 1）细胞收集：用含蛋白酶抑制剂的 PBS 洗涤离心，去上清的细胞收集液可置 -80° 冻存； 2）用 SDS 重悬细胞后可置 -80° 冻存； 3）sonication 结束，离心后的上清置新的离心管后可 -80° 冻存； 4）reverse cross

最全面的MTT大汇总

药物的介质，而加药组加入不同浓度的药物。8.避免血清干扰。用含15％胎牛血清培养液培养细胞时，高的血清物质会影响试验孔的光吸收值。由于试验本底增加，会试验敏感性。因此，一般选小于10％胎牛血清的培养液进行。在呈色后，尽量吸净培养孔内残余培养液。实验步骤贴壁细胞：1.收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入100ul,铺板使待测细胞调密度至1000-10000孔，（边缘孔用无菌PBS填充）。2.5%CO2，37℃孵育，至细胞单层铺满孔底（96孔平底板）,加入浓度梯度的药物,原则上，细胞贴壁后即可