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小鼠E钙粘着蛋白;上皮性钙黏附蛋白(E-Cad)ELISA试

剂盒
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  • ¥2
  • 仕诺达
  • 6.25 ng/mL – 200 ng/mL
  • SND-M003
  • 安徽
  • 2025年12月19日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 供应商

      仕诺达生物

    • 库存

      999

    • 样本

      血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本

    • 标记物

      小鼠E钙粘着蛋白;上皮性钙黏附蛋白

    • 适应物种

      小鼠

    • 应用

      高校,中科院,研发单位

    • 检测方法

      ELISA

    • 检测范围

      6.25 ng/mL – 200 ng/mL

    • 规格

      48T/96T

    规格:48T产品价格:询价
    规格:96T产品价格:¥2.0
    小鼠E钙粘着蛋白;上皮性钙黏附蛋白(E-Cad)ELISA试剂盒产品细节图片1
    本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中小鼠E钙粘着蛋白;上皮性钙黏附蛋白(E-Cad)的含量

    ■此价格为产品目录价,针对客户购买情况公司有不同的优惠折扣,欢迎咨询订购~
    ■郑重申明:本公司销售所有产品均为实物拍摄,如产品出现质量问题,本公司包一切售后!!!
    ■500元以上包邮,本公司提供正规发票,货到付款,干冰直发,可按科研实验要求定制产品!!!
    ■本公司已与很多高校中科院及研发单位合作并也获得了老师的认可和推荐!!!


    有效期:6个月
    保存条件:2-8℃
    本试剂盒仅供科研使用,不得用于临床诊断
     
    实验原理
    试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被小鼠E钙粘着蛋白;上皮性钙黏附蛋白(E-Cad)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠E钙粘着蛋白;上皮性钙黏附蛋白(E-Cad)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
     产品细节图片2
    样本处理及要求
    1.  血清将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
    2.  血浆用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
    3.  组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。

    4.  细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
    注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
     
    需要而未提供的试剂和器材
    1. 酶标仪(450nm)
    2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
    3. 37℃恒温箱
    4. 蒸馏水或去离子水
     
    试剂盒组成
     
    名称 96孔配置 48孔配置 备注
    微孔酶标板 12孔×8 12孔×4
    标准品 0.3mL*6管 0.3mL*6管
    样本稀释液 6mL 3mL
    检测抗体-HRP 10mL 5mL
    20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释
    底物A 6mL 3mL
    底物B 6mL 3mL
    终止液 6mL 3mL
    封板膜 2张 2张
    说明书 1份 1份
    自封袋 1个 1个

    1.  标准品浓度依次为:200、100、50、25、12.5、6.25 ng/mL
    2.  经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过最大标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。
     
    注意事项
    1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
    2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
    3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
    4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
    5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
    6. 在储存和温育时避免强光直接照射。
    7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
    8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
    9. 不能使用过期产品。
    10. 如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
     
    试剂准备
    试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。
    20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
     
    操作步骤
    1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
    2.  设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
    3.  样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
    4.  除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
    5.  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
    6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
    7.  每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
     
    实验结果计算
    以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。
     产品细节图片3
    试剂盒性能
    1.  检测范围:6.25 ng/mL – 200 ng/mL。
    2.  灵敏度:最低检测浓度小于1.0 ng/mL。
    3.  特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
    4.  重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 。

    产品细节图片4滁州仕诺达生物科技有限公司(Chuzhou shinuoda Biological Technology Co., Ltd.)是一家以技术开发、转让、销售及咨询服务为一体的生物科技有限公司,公司主要研发销售生物试剂,为全球科研客户提供优质的产品和技术服务。 公司主营产品包括:ELISA试剂盒、动物血制品、标准品、染色液、试剂、抑制剂、酶相关试剂以及仪器设备等 经销品牌:Thermo Fisher Scientific、CST、abcam、santa cruz、sigma、Corning、Axygen、NEB、Novus、BD、R&D、阿拉丁(未提及品牌,本公司也可以代买) 公司以“产品质量第一,服务至上”为企业宗旨,秉承友好共赢的合作理念,立志给科研界老师提供我们力所能及的帮助。如果您对我公司的产品及服务有兴趣,期待您给我们个机会在线留言或者来电咨询。

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