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2D 凝胶的蛋白 Edman 测序

1. 前言 如能通过电转移或其他相关技术将蛋白样品从凝胶相有效转移到适合于气相测序 ( gas-phase  sequencing) 的其他介质上时，则 2D 凝胶分离的蛋白可进行 Edman 测序 [1] 。首先，皮摩尔数量级的蛋白通过 2D-PAGE 分离 [2]，然后经电转移从 2D-PAGE 凝胶上转移到 PVDF 膜上，再通过 Edman 测序法进行蛋白质的氨基酸测序。蛋白质 N 端顺序测定法—— Edman 降解是非常灵敏的测序方法（只需 1~5 μg 的蛋白质）。但是当出现

【原创】Protein A Sepharose 之进化篇。。。

洗脱条件比较剧烈，最后收集的蛋白质很有可能变性，或者是复性困难。 这种洗脱条件剧烈的Protein A 柱结合的重组蛋白质A一般具有5个串联结构域：E、D、A、B、C。这种重组蛋白A虽然除去了不重要的非结合域，仅由5个结构域组成，每个域均可以和IgG的Fc段结合，但不同的域结合强度略有差异。因此洗脱条件不均一，而且经常需要较低的pH值。如果减少串联结构域的个数，并且采取同型结构域串联，就可以避免不同结构域与抗体Fc 段亲和性的差异，洗脱条件会温和而均一。为此，我们可以做一个试验，比较一下

三句话读懂一篇 CNS：限时饮食 vs 热量限制，哪个减重效果更好？为何男性更易患癌且生存率更低？

重点实验室陈崇教授团队在 Nature Cancer 杂志发表研究论文 KMT2C deficiency promotes small cell lung cancer metastasis through DNMT3A-mediated epigenetic reprogramming。 该研究构建了小细胞肺癌小鼠模型，利用多组学分析和体内功能研究，阐明了组蛋白甲基转移酶 KMT2C 缺失通过组蛋白-DNA 协同低甲基化促进 SCLC 远端转移的表观遗传学机制！ 图 2：来源 Nature