GEMINI胎牛血清(货号:900-108)
GEMINI公司,成立于1985年,位于加利福尼亚南部Calabasas市,1999年,迁加利福尼亚北部Woodland市。Gemini公司在全球销售的动物血清产品,全部来自于澳洲的子公司,血源主要为澳大利亚、新西兰、巴拿马、乌拉圭、巴西和阿根廷等。Gemini始终以“为客户提供高质量产品”为首要目标,尤其在细胞培养用胎牛血清方面,Gemini产品质量好、价格低,和同类产品相比竞争力强。
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Gemini已登录中国大陆,6年之久,Gemini血清已走进全国500多家实验单位,以其好的质量、完善的售后,较低的价格,越来越被国内科研人员所认可。
GEMINI胎牛血清,江林生物常备现货之一:
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GEMINI 100-512 人AB血清 100 ML
◆细胞培养中出现黑点是污染吗?如何处理?
一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成,首先,要肉眼观察培养基是否混浊。
然后,在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动。
如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。
◆如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么,黑点的出现可能与以下几种情况有关:
(1) 细胞生长过老,破碎的细胞残骸;
(2) 血清质量不好,反复冻融的结果;
(3) 配制培养基的pH值偏高,不宜细胞生长;
(4) 配制培养基的水质、容器不合格。可用离心、过滤的方法去除这些黑点;
(5) 培养原代细胞中出现小黑点,可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除。
◆有必要做热灭活吗?
热灭活血清对大多数的细胞而言是不需要的。
◆小牛血清和胎牛血清有何区别与注意事项?
来源不同:胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS) 是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calf serum,CS)采自出生10至14 天的小牛。
各成分占比不同:两者所含的促细胞生长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组份与比例不同,用途与用法不同:某些细胞必需胎牛血清才能生长,而有些细胞只需小牛血清即可,使用浓度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的浓度在20%。
血清保存和使用须注意:血清应保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超过一个月。解冻血清时 ,应先将血清至于2-8℃,并经常摇匀使之溶解,然后至室温放置使之升温,绝对不可将冷冻的血清直接放入37℃水浴或者温箱中,如放在37℃解冻,颜色加深,粘稠度也会增加,血清在解冻和热灭活后,应按用量分装并于-20℃保存,避免反复冻融。
常见问题问答:
一、血清或培养基产生了颜色或沉淀的问题:
问:我用的是四季青的胎牛血清,56℃30分钟灭活后出现了白色少量絮状沉淀,是不是污染?还能不能 再用?血清的生产日期是2006年7月(现在是2007年6月11日)。
答:应该问题不大。你可以取少量血清放入培养皿中,37℃过夜培养看看就知道是否污染了。血清中沉淀 物的出现有许多种原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在 血渭解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。 若您欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。
二、悬浮细胞培养时能否加血清?如果加了会有什么结果?为什么悬浮细胞培养时就不能加血清?
答:血清是细胞培养基中重要的培养成份之一,对细胞生长有广泛影响。在细胞培养时,我们通常会加入 10%的血清。血清的质量对细胞培养的成功至关重要。一般说来,牛血清包括以下成分:生长因子(如激素,白细胞介 素等),他们可以促进细胞生长;贴附因子,他们可以促进细胞的贴壁,往往只有细胞贴壁才能增值(悬浮培养的细胞 除外);蛋白质(如血清白蛋白,球蛋白等),既可以作为营养物质,又可以中止胰酶的作用;还有很多成分不明的物 质。血清还可以起到解毒作用,如脂肪酸、重金属和某些蛋白酶的毒性。血清还可以是细胞免受机械损伤。因此,无 论是贴壁细胞还是悬浮细胞,血清是必不可少的。除非因实验要求无血清培养时,例如:为使细胞同步化时,我们会 采用无血清培养的。单纯的说悬浮细胞培养不能加血清就没有太多的道理了。
三、血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理:
答:血清中沉淀物的出现有许多种原因,但普的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成 凝血的蛋白之一)在血渭解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。
若您欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培 养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。
四、如何避免沉淀物的产生?
答:我们建议您在使用血清的时候,注意下列的操作 :
(1)解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-2O℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃ 至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。
(2)解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。
(3)请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会 因此受到损害,而影响血清的质量。
(4)血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。
(5)若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30 分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇 晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。
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