CENP-A Antibody

CENP-A Antibody抗体的多样性：
抗体的异质性。抗体的组成极为复杂，是由成千上万、多种多样的免疫球蛋白（Ig）分子所组成。这些Ig分子在形状、大小、结构以及氨基酸的组成和排列上，既相似，又有差别。由于有差别，它们的电泳活性就有很大的变化。
因为抗体具有与抗原决定簇相对应的结合部位（抗原结合簇），所以抗体与抗原的结合具有特异性。另一方面，抗体本身是一种蛋白质，具有本身的氨基酸组成、排列和立体结构，对异种动物来说，它又是抗原。各类Ig都具有可用血清学方法检出的抗原特异性，它们表现出不同的血清学类型。

单克隆抗体：
1.概念：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。
2.特点：化学性质单一，特异性强，灵敏度高。
3.单克隆抗体的应用：
（1）诊断疾病：诊断病毒引起的疾病和用癌细胞抗原制备的单克隆抗体定位诊断。
（2）药物导向治疗：运用药物与单克隆抗体连接在一起制成“生物导弹”
（3）分离和纯化抗原分子。单抗的制备过程：
1.动物免疫：注射特定抗原蛋白
2.分离脾淋巴细胞：与培养好的骨髓瘤细胞混合，人工诱导细胞融合。
3.细胞融合：淋巴细胞杂交瘤的制备
4.杂交瘤细胞的筛选：HAT选择培养基筛选出杂交瘤细胞。（含次黄嘌呤（H）、氨基喋呤（A）及胸腺嘧啶核苷（T）的一种培养基，其中三种成分与细胞DNA合成有关，骨髓瘤细胞遗传缺陷型，不能利用）
5.培养杂交瘤细胞：体外培养杂交瘤细胞，从培养液中分离提取单克隆抗体。或者，将杂交瘤细胞移植到小鼠腹腔内，从小鼠腹水中分离提取单克隆抗体。
6.单克隆抗体的制备和冻存、纯化
单抗原理：
抗体主要由B淋巴细胞合成。每个B淋巴细胞有合成一种抗体的遗传基因。动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系，含遗传基因不同的B淋巴细胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时，抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成多克隆，并合成多种抗体。如果能选出一个制造一种专一抗体的细胞进行培养，就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群，即单克隆。单克隆细胞将合成一种决定簇的抗体，称为单克隆抗体。

单抗制备过程：
1.提取合成专一性抗体的单个B淋巴细胞（不能在体外生长）。
2.应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，得到杂交瘤细胞。
3.对杂交瘤细胞进行细胞培养，选出所需要的细胞群，并进行克隆化培养，得到稳定的杂交瘤细胞，再进行大规模培养获得单克隆抗体。
4.提纯，一般常用金黄色葡萄球菌蛋白A－琼脂糖4B亲和层析法。
多抗和单抗特性比较：
（1）均一性。一种单抗中，每个抗体的化学结构和氨基酸顺序都相同，只有一种Ig亚类。多抗是多种种类和亚类Ig的混合物。
（2）稳定性。单抗对PH变化敏感，对热不稳定，提纯过程中易变性，而多抗的稳定性则较好。 （3）特异性。单抗是单一地针对抗原的某一决定簇，所以用它进行血清学反应时，特异性强，敏感性高，一般不发生交叉反应。而多抗能与抗原上的多种抗原决定簇结合，所以特异性较差，较易引起交叉反应。
  （4）重复性。单抗的重复性好，而多抗每批都不一样。
  （5）沉淀反应。多抗由于与抗原多价结合容易形成网络样沉淀，而单抗只与抗原结合产生二聚体，不能直接形成抗原抗体沉淀物。