Screen Quest FRET No Wash cAMP

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产品货号：AAT-36379-E

产品规格：1plate

背景资料：Screen Quest检测试剂盒是一类用于检测各种细胞离子通道以及电位等系列工具，包括膜电位、钙离子流、多药物抗性、氯离子以及氯离子通道等方面的指标。每种检测方案均能提供不同的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。G蛋白偶联受体（GPCR）是药物发现过程最大的受体目标之一。钙通量（偶联于Gq信号通路）实验是药物筛选GPCR标的过程中优先使用方法。然而，超过60%已知GPCRs信号是通过偶联cAMP腺苷酸环化酶活性，而cAMP是胞内信号传导是一种重要第二信使。因此检测cAMP水平是筛选GPCRs激动剂和拮抗剂的最通用方法。

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产品描述：Screen Quest No Wash FRET cAMP检测试剂盒提供另一种方便方法，来检测G蛋白偶联受体中腺苷酸环化酶的活性。与其他商业化cAMP ELISA检测试剂盒相比，该检测试剂盒不需要清洗和乙酰化步骤。本实验是基于cAMP荧光示踪物与无标记游离cAMP竞争性结合到有线的anti-cAMP抗体上的原理，即无标记的游离cAMP将HRP-cAMP/anti-cAMP抗体复合物中的cAMP荧光示踪物替换。其中anti-cAMP抗体上标记了独有的TR Fluor Tb，而cAMP荧光示踪物上则标记了bFluor 650。在缺少cAMP时，bFluor 650-cAMP荧光示踪物特异性的结合到TR Fluor Tb标记的anti-cAMP抗体上，产生强烈的荧光共振能量转移（FRET）。然而，当加入未标记的游离cAMP时，与bFluor 650-cAMP荧光示踪物竞争性的结合TR Fluor Tb标记anti-cAMP抗体复合物。由于bFluor 650标记的cAMP示踪物荧光寿命仅仅几纳秒，而结合到TR Fluor Tb标记的anti-cAMP抗体后，则由于FRET具有长得多的荧光寿命。这样，荧光共振能量转移（FRET）大小与样本中cAMP成比例，从而实现cAMP的定量。本实验可以方便的用于96和384微孔板。

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