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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
9999
- 供应商:
仕诺达
- 检测范围:
1. 阴性对照OD值:小于0.2。 2. 阳性对照OD值:大于0.8。
- 检测方法:
ELISA
- 应用:
高校,中科院,研发单位
- 适应物种:
人
- 标记物:
人乙型肝炎病毒表面抗原
- 样本:
血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本
- 规格:
96T

本试剂盒用于体外定性检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中人乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)。
实验原理
试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、阴性和阳性对照、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),判定阴阳性。
■郑重申明:本公司销售所有产品均为实物拍摄,如产品出现质量问题,本公司包一切售后!!
■本公司已与很多高校中科院及研发单位合作并也获得了老师的认可和推荐!!
■所有ELISA试剂盒包邮,并免费提供代测服务,试剂盒重复性好,灵敏度高,抗体特异性强,检测范围可按照具体实验要求调整,有专业耐心的售前售中售后服务!!
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样本处理及要求
1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
需要而未提供的试剂和器材
- 酶标仪(450nm)
- 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
- 37℃恒温箱
- 蒸馏水或去离子水
试剂盒组成
| 名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
| 微孔酶标板 | 96孔 | 48孔 | 无 |
| 阴性对照 | 0.3mL | 0.3mL | 无 |
| 阳性对照 | 0.3mL | 0.3mL | 无 |
| 样本稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
| 检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
| 20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
| 底物A | 6mL | 3mL | 无 |
| 底物B | 6mL | 3mL | 无 |
| 终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
| 封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
| 说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
| 自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
注意事项
- 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
- 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
- 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
- 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
- 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
- 在储存和温育时避免强光直接照射。
- 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
- 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
- 不能使用过期产品。
- 如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
试剂准备
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
操作步骤
- 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
- 设置阴性对照孔、阳性对照孔和样本孔,阴性、阳新对照孔各加50μL对照品;
- 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
- 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
- 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
- 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
- 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
实验结果计算
1. 阴性对照OD值:小于0.2。
2. 阳性对照OD值:大于0.8。
3、阳性判断(Cut-Off值):阴性对照OD值+0.15,样本OD值大于阈值,判定为阳性,反之,为阴性。
滁州仕诺达生物科技有限公司(Chuzhou shinuoda Biological Technology Co., Ltd.)是一家以技术开发、转让、销售及咨询服务为一体的生物科技有限公司,公司主要研发销售生物试剂,为全球科研客户提供优质的产品和技术服务。 公司主营产品包括:ELISA试剂盒、动物血制品、标准品、染色液、试剂、抑制剂、酶相关试剂以及仪器设备等 经销品牌:Thermo Fisher Scientific、CST、abcam、santa cruz、sigma、Corning、Axygen、NEB、Novus、BD、R&D、阿拉丁(未提及品牌,本公司也可以代买) 公司以“产品质量第一,服务至上”为企业宗旨,秉承友好共赢的合作理念,立志给科研界老师提供我们力所能及的帮助。如果您对我公司的产品及服务有兴趣,期待您给我们个机会在线留言或者来电咨询。
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文献和实验产生假阳性反应。一般说来,在 3 天内测定的血清标本可放置于 4℃,超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂。 2. 试剂的准备 按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。 ELISA 中用的蒸馏水或去离子
免疫吸附试验 (ELISA)法检查 HBsAg,上海荣盛生产的试剂盒,严格按照厂家所附说明书操作,机洗或手工洗涤完成后,垂直检测孔中心滴加显色剂 B后,这时不混匀,小心放置 37℃, 15min后目测结果。当发现某孔壁上有一比较集中的显色点时,作好记录,再摇混匀,酶标仪读数,并复查其结果,方发出报告. 2 结果与讨论 总查出阳性6861例,而发现以上现象166次,占阳性结果的2. 4%左右。在溶血或混有血球的标本中发现102次,无溶血标本中发现64次。混匀后目测结果,其颜色深浅不一,酶标仪测 OD
RAT/MOUSE GROWTH HORMONE ELISA KIT
实验原理 This assay is a Sandwich ELISA based, sequentially, on: 1) capture of rat or mouse Growth Hormone molecules from samples to the wells of a microtiter plate coated by a pre-titered amount of anti-Growth Hormone
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