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- SHBio
- 进口
- SHC5032
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
SHCC
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
| 产品名称： | T/G HAVSMC |
|---|---|
| 商品货号： | SHC-0894 |
| 中文名称： | 人主动脉血管平滑肌细胞 |
| 细胞数量： | 1*10^6 |
| 组织来源： | 主动脉血管平滑肌细胞 |
| 细胞种属： | 人 |
| 生长特性： | 贴壁 |
| 细胞污染： | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养基： | H-DMEM，90%；FBS，10%；双抗。 |
| 传代方法： | 1:2-1:4 |
| 培养条件： | Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃ |
| 细胞传代步骤： | 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 复苏细胞步骤： | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤： | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 细胞冻存： | Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%（for reference）Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase |
| 细胞运输： | 干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输（T25细胞瓶） |
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文献和实验最近第一次养细胞就养成功了,非常高兴,发上来跟大家分享 养细胞主要是 无菌 ,我用得是组织块消化法,首先要把培养用的DMEM和PBS 用过滤法抽吸式过滤一下,取材时注意无菌,150克的大鼠用7毫升的1%戊巴比妥消毒,用DMEM反复清洗,用眼科剪刮去外膜,剪开血管,用棉签刮去内膜的脂滴,再用眼科剪剪成碎块,铺到培养瓶里,均匀铺开,滴少许含20%FCS的DMEM湿润一下,然后再加3---5毫升的DMEM(含20%FCS)到培养瓶内,使铺组织块的一面向上,放到孵育箱里,约5个小时
Isolation of renal vascular trees and culture of the vascular smooth muscle cell 1. Male Wistar rats of about 250 g body wt were anesthetized with ether and were decapitated. 2. Kidneys and thoracic aorta were removed, rinsed
培养了快一个月的细胞了，今天终于鉴定出是我想要的血管平滑肌细胞。我养的是大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,采用的是组织贴块法培养。10天后传第一代（图1），16天后第二代（图2），22天后第三代（图3），并做a－actin免疫细胞化学鉴定（图4）。 图1图2图3 图4典型的血管平滑肌细胞生长"hill and valley"现象。
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