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- SHBio
- 进口
- SHC4612
- 2025年07月12日
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- 库存：
100
- 供应商：
SHCC
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
| 产品名称： | hEM15A |
|---|---|
| 商品货号： | SHC-1363 |
| 中文名称： | 人子宫内膜异位症患者在位内膜间质细胞永生化细胞 |
| 组织来源： | 子宫异位内膜上皮细胞；永生化；女性 |
| 形态特征： | 梭形 |
| 生长特性： | 贴壁生长 |
| 特征特性： | ER+；PR+ |
| 细胞污染： | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养条件： | 基础培养基+8%DMSO+20%FBS |
| 细胞冻存步骤： | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 复苏细胞步骤： | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞传代步骤： | 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 冻存条件： | 基础培养基+8%DMSO+20%FBS |
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文献和实验，可达0.5～1cm，表面光滑，柔软，也可呈不规则形或息肉状。镜下，可分4种类型：①单纯型，子宫内膜腺体及间质均增生，腺体明显增多、大小不一、分布不均（图13-6）。偶见腺体扩大成囊，腺上皮细胞呈柱状，缺乏分泌，往往排列成假复层。核分裂像常见。间质细胞排列紧密。②囊腺型，以增生腺体呈明显囊性扩张为特征。典型病例肉眼可见在增厚的内膜中有散在小孔形成，因此称之为瑞士干酪样增生。镜下，内膜腺体形状多样，大小极不一致，小者如增生早期的腺体，大者直径可为小的数倍至数十倍，大小腺体皆衬以假复层高柱状或立方上皮
1、认真按照操作规程进行实验，一般不大会导致污染，很多情况下是由于所用的试剂或培养基有污染而使实验失败，2、粉末培养基配制好后 ( 加了血清 ) ，一般在 4 度尽量不要超过 1 个月，如在 -20 度 存放时间 可长一些，但最好也不要超过 3-4 个月，可能对于永生化细胞株来说要求不是太高，但我在过去的 4 年里一直是作原代细胞培养的，细胞娇弱，经验表明放置时间不宜过长。3、关于实验用品的清洗与消毒，我的经验是：用过的玻璃器皿先在清水中浸泡 30min 以上，然后加少许清洗剂，以超声波洗涤
。7.关于工作浓度的胰酶是不是应保存在－20度？如果放在4度冰箱可以保存多久？是不是几个小时就会失去活性？平时放在-20度，分装在50毫升螺口管，用时拿一管放4度用。8.认真按照操作规程进行实验，一般不大会导致污染，很多情况下是由于所用的试剂或培养基有污染而使实验失败，9.粉末培养基配制好后(加了血清)，一般在4度尽量不要超过1个月，如在-20度存放时间可长一些，但最好也不要超过3-4个月，可能对于永生化细胞株来说要求不是太高，但我在过去的4年里一直是作原代细胞培养的，细胞娇弱，经验表明放置时间不宜过长
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